از بازدید شما از Nature.com سپاسگزاریم. نسخه مرورگری که استفاده می کنید پشتیبانی محدودی از CSS دارد. برای بهترین نتایج، توصیه می کنیم از یک مرورگر جدیدتر (یا غیرفعال کردن حالت سازگاری در اینترنت اکسپلورر) استفاده کنید. در ضمن، برای اطمینان از پشتیبانی مستمر، سایت را بدون استایل و جاوا اسکریپت نمایش خواهیم داد.
پرورش حشرات روشی بالقوه برای پاسخگویی به تقاضای روزافزون جهانی برای پروتئین است و فعالیت جدیدی در دنیای غرب است که در آن سوالات زیادی در مورد کیفیت و ایمنی محصول باقی مانده است. حشرات می توانند با تبدیل زباله های زیستی به زیست توده با ارزش نقش مهمی در اقتصاد دایره ای ایفا کنند. حدود نیمی از بستر خوراک کرمهای آردآلو از خوراک مرطوب تهیه میشود. این را می توان از زباله های زیستی به دست آورد و باعث پایداری بیشتر پرورش حشرات شد. این مقاله در مورد ترکیب تغذیهای کرمهای خوراکی (Tenebrio molitor) که با مکملهای ارگانیک از محصولات جانبی تغذیه میشوند، گزارش میدهد. اینها شامل سبزیجات فروخته نشده، برش های سیب زمینی، ریشه کاسنی تخمیر شده و برگ های باغچه است. با تجزیه و تحلیل ترکیب تقریبی، مشخصات اسیدهای چرب، محتوای مواد معدنی و فلزات سنگین ارزیابی می شود. کرمهای خوراکی تغذیهشده با برشهای سیبزمینی دارای محتوای چربی دو برابری و افزایش اسیدهای چرب اشباع و تک غیراشباع بودند. استفاده از ریشه کاسنی تخمیر شده باعث افزایش محتوای معدنی و تجمع فلزات سنگین می شود. علاوه بر این، جذب مواد معدنی توسط کرم آردآلو انتخابی است، زیرا تنها غلظت کلسیم، آهن و منگنز افزایش می یابد. افزودن مخلوط سبزیجات یا برگ های باغچه به رژیم غذایی تغییر قابل توجهی در مشخصات تغذیه ای ایجاد نمی کند. در نتیجه، جریان محصول فرعی با موفقیت به یک زیست توده غنی از پروتئین تبدیل شد که محتوای مواد مغذی و فراهمی زیستی آن بر ترکیب کرمهای خوراکی تأثیر گذاشت.
انتظار می رود جمعیت رو به رشد انسان تا سال 20501 به 9.7 میلیارد نفر برسد. تخمین زده می شود که تقاضای غذا بین سال های 2012 و 20503 70-80 درصد افزایش یابد. منابع طبیعی مورد استفاده در تولید مواد غذایی فعلی رو به اتمام است و اکوسیستم ها و منابع غذایی ما را تهدید می کند. علاوه بر این، مقادیر زیادی از زیست توده در ارتباط با تولید و مصرف مواد غذایی تلف می شود. تخمین زده می شود که تا سال 2050، حجم جهانی زباله سالانه به 27 میلیارد تن برسد که بیشتر آن زباله های زیستی 6،7،8 است. در پاسخ به این چالش ها، راه حل های نوآورانه، جایگزین های غذایی و توسعه پایدار کشاورزی و سیستم های غذایی پیشنهاد شده است9،10،11. یکی از این رویکردها استفاده از بقایای ارگانیک برای تولید مواد خام مانند حشرات خوراکی به عنوان منابع پایدار غذا و خوراک است12،13. پرورش حشرات انتشار گازهای گلخانه ای و آمونیاک کمتری را تولید می کند، به آب کمتری نسبت به منابع پروتئینی سنتی نیاز دارد و می تواند در سیستم های پرورش عمودی تولید شود که به فضای کمتری نیاز دارد 14،15،16،17،18،19. مطالعات نشان داده است که حشرات می توانند زباله های زیستی کم ارزش را به زیست توده با ارزش غنی از پروتئین با محتوای ماده خشک تا 70% 20،21،22 تبدیل کنند. علاوه بر این، زیست توده کم ارزش در حال حاضر برای تولید انرژی، دفن زباله یا بازیافت استفاده می شود و بنابراین با بخش غذا و خوراک فعلی رقابت نمی کند. کرم آرد (T. molitor)27 یکی از امیدبخش ترین گونه ها برای تولید غذا و خوراک در مقیاس بزرگ در نظر گرفته می شود. هم لاروها و هم حشرات بالغ از مواد مختلفی مانند محصولات غلات، فضولات حیوانی، سبزیجات، میوه ها و غیره تغذیه می کنند. 28،29. در جوامع غربی، T. molitor در اسارت در مقیاس کوچک، عمدتاً به عنوان خوراک حیوانات اهلی مانند پرندگان یا خزندگان، پرورش داده می شود. در حال حاضر پتانسیل آنها در تولید غذا و خوراک بیشتر مورد توجه 30،31،32 قرار گرفته است. به عنوان مثال، T. molitor با مشخصات غذایی جدید، از جمله استفاده در اشکال منجمد، خشک و پودر شده (مقررات (EU) No 258/97 و مقررات (EU) 2015/2283) 33 تایید شده است. با این حال، تولید در مقیاس بزرگ استفاده از حشرات برای غذا و خوراک هنوز یک مفهوم نسبتاً جدید در کشورهای غربی است. این صنعت با چالش هایی مانند شکاف دانش در مورد رژیم غذایی و تولید بهینه، کیفیت تغذیه ای محصول نهایی و مسائل ایمنی مانند تجمع سموم و خطرات میکروبی مواجه است. برخلاف دامداری سنتی، پرورش حشرات سابقه تاریخی مشابهی ندارد17،24،25،34.
اگرچه مطالعات زیادی در مورد ارزش غذایی کرم های آردآلو انجام شده است، اما عوامل موثر بر ارزش غذایی آنها هنوز به طور کامل شناخته نشده است. مطالعات قبلی نشان داده است که رژیم غذایی حشرات ممکن است تا حدودی بر ترکیب آن تأثیر بگذارد، اما هیچ الگوی واضحی یافت نشد. علاوه بر این، این مطالعات بر روی اجزای پروتئینی و لیپیدی کرمهای خوراکی متمرکز بودند، اما اثرات محدودی بر اجزای معدنی داشتند. تحقیقات بیشتری برای درک ظرفیت جذب مواد معدنی مورد نیاز است. یک مطالعه اخیر به این نتیجه رسید که لارو کرم آردآلو تغذیه شده با تربچه دارای غلظت کمی از مواد معدنی خاص است. با این حال، این نتایج محدود به بستر آزمایش شده است و آزمایشات صنعتی بیشتری مورد نیاز است. گزارش شده است که تجمع فلزات سنگین (Cd، Pb، Ni، As، Hg) در کرمهای آردآلو با محتوای فلزی ماتریکس ارتباط معنیداری دارد. اگرچه غلظت فلزات موجود در جیره غذایی در خوراک دام کمتر از حد مجاز است42، آرسنیک نیز در لارو کرم آردآلو تجمع زیستی دارد، در حالی که کادمیوم و سرب تجمع زیستی ندارند43. درک اثرات رژیم غذایی بر ترکیب تغذیهای کرمهای خوراکی برای استفاده ایمن از آنها در غذا و خوراک حیاتی است.
مطالعه ارائه شده در این مقاله بر تأثیر استفاده از محصولات جانبی کشاورزی به عنوان منبع تغذیه مرطوب بر ترکیب تغذیهای کرمهای خوراکی متمرکز است. علاوه بر غذای خشک، تغذیه مرطوب نیز باید در اختیار لاروها قرار گیرد. منبع تغذیه مرطوب رطوبت لازم را فراهم می کند و همچنین به عنوان یک مکمل تغذیه ای برای کرم های خوراکی عمل می کند و سرعت رشد و حداکثر وزن بدن را افزایش می دهد. طبق داده های استاندارد پرورش کرم آرد ما در پروژه Interreg-Valusect، کل خوراک کرم آردآلو حاوی 57 درصد وزنی بر وزن خوراک مرطوب است. معمولاً سبزیجات تازه (به عنوان مثال هویج) به عنوان منبع تغذیه مرطوب استفاده می شود 35،36،42،44،46. استفاده از محصولات جانبی کم ارزش به عنوان منابع تغذیه مرطوب، مزایای پایدار و اقتصادی بیشتری برای پرورش حشرات به همراه خواهد داشت. اهداف این مطالعه (1) بررسی اثرات استفاده از زبالههای زیستی به عنوان خوراک مرطوب بر ترکیب تغذیهای کرمهای آردآلو، (2) تعیین محتوای درشت و ریز مغذی لارو کرم آردآلو پرورش یافته بر روی زبالههای زیستی غنی از مواد معدنی برای آزمایش امکانسنجی غنی سازی معدنی، و (3) ارزیابی ایمنی این محصولات جانبی در پرورش حشرات با تجزیه و تحلیل حضور و تجمع مواد سنگین فلزات سرب، کادمیوم و کروم این مطالعه اطلاعات بیشتری در مورد اثرات مکملسازی زبالههای زیستی بر رژیم غذایی لارو کرم آردآلو، ارزش غذایی و ایمنی ارائه میدهد.
محتوای ماده خشک در جریان جانبی در مقایسه با آگار مغذی مرطوب کنترل بیشتر بود. محتوای ماده خشک در مخلوط سبزیجات و برگهای باغ کمتر از 10 درصد بود، در حالی که در قلمههای سیبزمینی و ریشههای کاسنی تخمیر شده (13.4 و 29.9 گرم در 100 گرم ماده تازه، FM) بیشتر بود.
مخلوط سبزیجات دارای خاکستر خام، چربی و پروتئین و محتوای کربوهیدرات غیر فیبری کمتری نسبت به خوراک شاهد (آگار) بود، در حالی که محتوای فیبر شوینده خنثی تیمار شده با آمیلاز مشابه بود. محتوای کربوهیدرات برشهای سیبزمینی از همه جریانهای جانبی بالاتر بود و با آگار قابل مقایسه بود. به طور کلی، ترکیب خام آن بیشتر شبیه به خوراک شاهد بود، اما با مقادیر کمی پروتئین (4.9٪) و خاکستر خام (2.9٪) تکمیل شد (47،48). PH سیب زمینی از 5 تا 6 متغیر است و شایان ذکر است که این جریان جانبی سیب زمینی اسیدی تر است (4.7). ریشه کاسنی تخمیر شده غنی از خاکستر است و اسیدی ترین ریشه در بین تمام جریان های جانبی است. از آنجایی که ریشه ها تمیز نشده اند، انتظار می رود بیشتر خاکستر از ماسه (سیلیکا) تشکیل شود. برگ های باغ تنها محصول قلیایی در مقایسه با شاهد و سایر جریان های جانبی بودند. حاوی سطوح بالایی از خاکستر و پروتئین و کربوهیدرات بسیار کمتری نسبت به شاهد است. ترکیب خام نزدیکترین به ریشه کاسنی تخمیر شده است، اما غلظت پروتئین خام بالاتر است (15.0٪) که با محتوای پروتئین مخلوط سبزیجات قابل مقایسه است. تجزیه و تحلیل آماری داده های فوق تفاوت معنی داری را در ترکیب خام و pH جریان های جانبی نشان داد.
افزودن مخلوط سبزیجات یا برگ های باغچه به خوراک کرم آردآلو تاثیری بر ترکیب زیست توده لارو کرم آردآلو نسبت به گروه کنترل نداشت (جدول 1). افزودن قلمههای سیبزمینی بیشترین تفاوت را در ترکیب زیستتوده نسبت به گروه کنترل دریافتکننده لارو کرم آردآلو و سایر منابع تغذیه مرطوب داشت. در مورد محتوای پروتئین کرمهای آردآلو، به استثنای قلمههای سیبزمینی، ترکیب تقریبی متفاوت جریانهای جانبی بر محتوای پروتئین لارو تأثیری نداشت. تغذیه قلمه های سیب زمینی به عنوان منبع رطوبت منجر به افزایش دو برابری محتوای چربی لارو و کاهش محتوای پروتئین، کیتین و کربوهیدرات های غیر فیبری شد. ریشه کاسنی تخمیر شده میزان خاکستر لارو کرم آردآلو را یک و نیم برابر افزایش داد.
پروفایل های معدنی به صورت محتوای درشت معدنی (جدول 2) و ریز مغذی ها (جدول 3) در خوراک مرطوب و زیست توده لارو کرم آردآلو بیان شد.
به طور کلی، جریان های جانبی کشاورزی در مقایسه با گروه شاهد از نظر ماکرومینرال غنی تر بودند، به جز قلمه های سیب زمینی که دارای محتوای منیزیم، سدیم و کلسیم کمتری بودند. غلظت پتاسیم در تمام جریانهای جانبی نسبت به شاهد بالا بود. آگار حاوی 3 میلی گرم در 100 گرم DM K، در حالی که غلظت پتاسیم در جریان جانبی بین 1070 تا 9909 میلی گرم در 100 گرم DM متغیر بود. محتوای ماکرومینال در مخلوط سبزیجات به طور قابل توجهی بیشتر از گروه کنترل بود، اما محتوای Na به طور قابل توجهی کمتر بود (88 در مقابل 111 میلی گرم در 100 گرم DM). غلظت ماکرومینال در قلمههای سیبزمینی در بین تمام جریانهای جانبی کمتر بود. محتوای ماکرومینال در قلمه های سیب زمینی به طور قابل توجهی کمتر از سایر جریان های جانبی و شاهد بود. با این تفاوت که محتوای منیزیم با گروه کنترل قابل مقایسه بود. اگرچه ریشه کاسنی تخمیر شده بیشترین غلظت ماکرومینرال ها را نداشت، اما میزان خاکستر این جریان جانبی بالاترین میزان را در بین تمام جریان های جانبی داشت. این ممکن است به دلیل این واقعیت باشد که آنها خالص نیستند و ممکن است حاوی غلظت بالایی از سیلیس (شن) باشند. محتوای سدیم و کلسیم با محتوای مخلوط سبزیجات قابل مقایسه بود. ریشه کاسنی تخمیر شده حاوی بالاترین غلظت سدیم در بین تمام جریان های جانبی بود. به استثنای سدیم، برگهای باغبانی بیشترین غلظت ماکرومینرالها را در بین تمام علوفههای مرطوب داشتند. غلظت پتاسیم (9909 میلی گرم در 100 گرم DM) سه هزار برابر بیشتر از شاهد (3 میلی گرم در 100 گرم DM) و 2.5 برابر بیشتر از مخلوط سبزیجات (4057 میلی گرم در 100 گرم DM) بود. محتوای کلسیم بالاترین در بین تمام جریان های جانبی (7276 میلی گرم در 100 گرم DM)، 20 برابر بیشتر از شاهد (336 میلی گرم در 100 گرم DM) و 14 برابر بیشتر از غلظت کلسیم در ریشه کاسنی تخمیر شده یا مخلوط سبزیجات بود. 530 و 496 میلی گرم در 100 گرم DM).
اگرچه تفاوت معنیداری در ترکیب ماکرومینرال جیرهها وجود داشت (جدول 2)، هیچ تفاوت معنیداری در ترکیب ماکرومینرال کرمهای آردآلو پرورشیافته در مخلوط سبزیجات و جیرههای شاهد مشاهده نشد.
لاروهای تغذیه شده با خرده های سیب زمینی به طور قابل توجهی غلظت کمتری از تمام ماکرومینرال ها در مقایسه با شاهد داشتند، به استثنای Na که غلظت های قابل مقایسه ای داشت. علاوه بر این، تغذیه سیبزمینی ترد بیشترین کاهش را در محتوای ماکرومینرال لارو نسبت به سایر جریانهای جانبی داشت. این با خاکستر پایینی که در فرمولاسیون کرم آردآلو مشاهده شده است، مطابقت دارد. با این حال، اگرچه فسفر و پتاسیم در این جیره مرطوب به طور قابل توجهی بالاتر از سایر جریان های جانبی و شاهد بود، ترکیب لارو این را منعکس نمی کرد. غلظت کم کلسیم و منیزیم موجود در زیست توده کرم آردآلو ممکن است به غلظت کم کلسیم و منیزیم موجود در خود جیره مرطوب مربوط باشد.
تغذیه ریشههای کاسنی تخمیر شده و برگهای باغ باعث افزایش قابل توجه کلسیم نسبت به گروه شاهد شد. برگهای باغ حاوی بالاترین سطوح فسفر، منیزیم، پتاسیم و کلسیم در بین جیرههای مرطوب بودند، اما این در زیست توده کرم آردآلو منعکس نشد. غلظت سدیم در این لاروها کمترین بود، در حالی که غلظت سدیم در برگ های باغ بیشتر از قلمه های سیب زمینی بود. محتوای کلسیم در لاروها افزایش یافت (66 میلی گرم در 100 گرم DM)، اما غلظت کلسیم به اندازه بیوماس کرم آردآلو (79 میلی گرم در 100 گرم DM) در آزمایشات تخمیری ریشه کاسنی نبود، اگرچه غلظت کلسیم در محصولات برگ باغی بود. 14 برابر بیشتر از ریشه کاسنی است.
بر اساس ترکیب ریز عناصر خوراک مرطوب (جدول 3)، ترکیب معدنی مخلوط سبزیجات مشابه گروه شاهد بود، با این تفاوت که غلظت منگنز به طور قابل توجهی کمتر بود. غلظت تمام عناصر ریز آنالیز شده در برش های سیب زمینی در مقایسه با شاهد و سایر محصولات جانبی کمتر بود. ریشه کاسنی تخمیر شده تقریباً 100 برابر آهن، 4 برابر مس، 2 برابر روی و تقریباً به همان میزان منگنز داشت. محتوای روی و منگنز در برگ گیاهان باغی به طور معنی داری بیشتر از گروه شاهد بود.
تفاوت معنی داری بین محتویات عناصر کمیاب لاروهای تغذیه شده با رژیم غذایی شاهد، مخلوط سبزیجات و ضایعات سیب زمینی مرطوب مشاهده نشد. با این حال، محتویات آهن و منگنز لاروهای تغذیه شده با جیره تخمیری ریشه کاسنی به طور قابل توجهی با کرم های خوراکی تغذیه شده با گروه کنترل متفاوت بود. افزایش محتوای آهن ممکن است به دلیل افزایش صد برابری غلظت عناصر کمیاب در خود جیره مرطوب باشد. با این حال، اگرچه تفاوت معنیداری در غلظت منگنز بین ریشههای کاسنی تخمیر شده و گروه کنترل وجود نداشت، اما سطوح منگنز در لاروهای تغذیهشده با ریشههای کاسنی تخمیر شده افزایش یافت. همچنین لازم به ذکر است که غلظت منگنز در جیره برگ مرطوب جیره باغبانی نسبت به شاهد بیشتر (3 برابر) بود، اما تفاوت معنی داری در ترکیب زیست توده کرم های آردآلو مشاهده نشد. تنها تفاوت بین برگ شاهد و باغبانی میزان مس بود که در برگها کمتر بود.
جدول 4 غلظت فلزات سنگین موجود در بسترها را نشان می دهد. حداکثر غلظت سرب، کادمیوم و کروم اروپایی در خوراک دام کامل به mg/100 گرم ماده خشک تبدیل شده و به جدول 4 اضافه شده است تا مقایسه با غلظت های موجود در جریان های جانبی را تسهیل کند.
هیچ سربی در خوراک مرطوب شاهد، مخلوط سبزیجات یا سبوس سیب زمینی مشاهده نشد، در حالی که برگ های باغ حاوی 0.002 میلی گرم سرب در 100 گرم DM و ریشه کاسنی تخمیر شده حاوی بالاترین غلظت 0.041 میلی گرم سرب در 100 گرم DM بود. غلظت C در خوراک شاهد و برگ باغ قابل مقایسه بود (0.023 و 0.021 میلی گرم در 100 گرم DM)، در حالی که آنها در مخلوط سبزیجات و سبوس سیب زمینی (0.004 و 0.007 میلی گرم در 100 گرم DM) کمتر بود. در مقایسه با سایر بسترها، غلظت کروم در ریشه کاسنی تخمیر شده به طور قابل توجهی بالاتر (0.135 میلی گرم در 100 گرم DM) و شش برابر بیشتر از خوراک شاهد بود. سی دی نه در جریان کنترل و نه در هیچ یک از جریان های جانبی مورد استفاده شناسایی نشد.
سطوح قابل توجهی بالاتر از سرب و کروم در لاروهای تغذیه شده با ریشه کاسنی تخمیر شده یافت شد. با این حال، کادمیوم در هیچ لارو کرم آرد آلود شناسایی نشد.
تجزیه و تحلیل کیفی اسیدهای چرب موجود در چربی خام برای تعیین اینکه آیا پروفایل اسید چرب لارو کرم آردآلو میتواند تحتتاثیر اجزای مختلف جریان جانبی که در آن تغذیه میشوند، باشد، انجام شد. توزیع این اسیدهای چرب در جدول 5 نشان داده شده است. اسیدهای چرب با نام مشترک و ساختار مولکولی آنها فهرست شده اند (که به عنوان "Cx:y" تعیین می شود، که در آن x مربوط به تعداد اتم های کربن و y با تعداد پیوندهای غیر اشباع است. ).
مشخصات اسیدهای چرب کرم های آردآلو تغذیه شده با تکه های سیب زمینی به طور قابل توجهی تغییر یافت. آنها حاوی مقادیر قابل توجهی اسید میریستیک (C14:0)، اسید پالمیتیک (C16:0)، اسید پالمیتولئیک (C16:1) و اسید اولئیک (C18:1) بودند. غلظت پنتادکانوئیک اسید (C15: 0)، اسید لینولئیک (C18: 2)، و اسید لینولنیک (C18: 3) به طور قابل توجهی در مقایسه با سایر کرمهای خوراکی کمتر بود. در مقایسه با سایر پروفایل های اسید چرب، نسبت C18: 1 به C18: 2 در تکه های سیب زمینی معکوس شد. کرمهای خوراکی تغذیهشده با برگهای باغبانی حاوی مقادیر بالاتری اسید پنتا دکانوئیک (C15: 0) نسبت به کرمهای خوراکی تغذیهشده با سایر جیرههای مرطوب بودند.
اسیدهای چرب به اسیدهای چرب اشباع (SFA)، اسیدهای چرب تک غیراشباع (MUFA) و اسیدهای چرب اشباع نشده (PUFA) تقسیم می شوند. جدول 5 غلظت این گروه های اسید چرب را نشان می دهد. به طور کلی، پروفایل اسیدهای چرب کرمهای خوراکی تغذیهشده با ضایعات سیبزمینی به طور قابلتوجهی با شاهد و سایر جریانهای جانبی متفاوت بود. برای هر گروه اسیدهای چرب، کرمهای خوراکی که با چیپس سیبزمینی تغذیه میشدند تفاوت معنیداری با سایر گروهها داشتند. آنها حاوی SFA و MUFA بیشتر و PUFA کمتری بودند.
تفاوت معنی داری بین میزان بقا و وزن عملکرد کل لاروهای پرورش یافته در بسترهای مختلف وجود نداشت. میانگین کلی میزان بقا 90 درصد و میانگین وزن کل عملکرد 974 گرم بود. کرمهای آرد با موفقیت محصولات جانبی را به عنوان منبع تغذیه مرطوب پردازش میکنند. خوراک مرطوب کرم آردآلو بیش از نیمی از وزن کل خوراک (خشک + مرطوب) را تشکیل می دهد. جایگزینی سبزیجات تازه با محصولات جانبی کشاورزی به عنوان خوراک مرطوب سنتی مزایای اقتصادی و زیست محیطی برای پرورش کرم آرد دارد.
جدول 1 نشان می دهد که ترکیب زیست توده لارو کرم آردآلو پرورش یافته در جیره شاهد تقریباً 72 درصد رطوبت، 5 درصد خاکستر، 19 درصد لیپید، 51 درصد پروتئین، 8 درصد کیتین و 18 درصد ماده خشک به عنوان کربوهیدرات های غیر فیبری بود. این با مقادیر گزارش شده در ادبیات قابل مقایسه است. 48،49 با این حال، اجزای دیگری را می توان در ادبیات یافت، اغلب بسته به روش تحلیلی مورد استفاده. به عنوان مثال، ما از روش Kjeldahl برای تعیین محتوای پروتئین خام با نسبت N به P 5.33 استفاده کردیم، در حالی که سایر محققان از نسبت پرکاربردتر 6.25 برای نمونه های گوشت و خوراک استفاده کردند. 50،51
افزودن ضایعات سیب زمینی (یک رژیم غذایی مرطوب غنی از کربوهیدرات) به رژیم غذایی منجر به دو برابر شدن محتوای چربی کرم آرد شد. انتظار می رود محتوای کربوهیدرات سیب زمینی عمدتاً از نشاسته باشد، در حالی که آگار حاوی قندها (پلی ساکاریدها) 47،48 است. این یافته برخلاف مطالعه دیگری است که نشان میدهد وقتی کرمهای آردآلو با رژیم غذایی مکمل با سیبزمینی پوستکنده شده با بخار که پروتئین کم (10.7 درصد) و نشاسته بالا (49.8 درصد) بود، تغذیه میشدند، محتوای چربی کاهش مییابد. هنگامی که تفاله زیتون به جیره اضافه شد، محتوای پروتئین و کربوهیدرات کرم های آرد با رژیم مرطوب مطابقت داشت، در حالی که محتوای چربی بدون تغییر باقی ماند. در مقابل، مطالعات دیگر نشان داده اند که محتوای پروتئین لاروهای پرورش یافته در جریان های جانبی، و همچنین محتوای چربی، دستخوش تغییرات اساسی می شود.
ریشه کاسنی تخمیر شده به طور قابل توجهی محتوای خاکستر لارو کرم آردآلو را افزایش داد (جدول 1). تحقیقات در مورد اثرات محصولات جانبی بر خاکستر و ترکیب معدنی لارو کرم آردآلو محدود است. اکثر مطالعات تغذیه محصولات جانبی بر روی محتوای چربی و پروتئین لاروها بدون تجزیه و تحلیل محتوای خاکستر متمرکز شده اند. با این حال، هنگامی که محتوای خاکستر لاروهای تغذیه شده با محصولات جانبی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت، افزایش محتوای خاکستر مشاهده شد. به عنوان مثال، تغذیه کرمهای آردآلو با ضایعات باغی، میزان خاکستر آنها را از 3.01 درصد به 5.30 درصد افزایش داد و افزودن ضایعات هندوانه به جیره، میزان خاکستر را از 1.87 درصد به 4.40 درصد افزایش داد.
اگرچه همه منابع غذایی مرطوب در ترکیب تقریبی آنها به طور قابل توجهی متفاوت بود (جدول 1)، تفاوت در ترکیب زیست توده لارو کرم آردآلو تغذیه شده با منابع غذایی مرطوب مربوطه جزئی بود. فقط لاروهای کرم آردآلو تغذیه شده با تکه های سیب زمینی یا ریشه کاسنی تخمیر شده تغییرات قابل توجهی را نشان دادند. یک توضیح احتمالی برای این نتیجه این است که علاوه بر ریشههای کاسنی، تکههای سیبزمینی نیز تا حدی تخمیر شدهاند (pH 4.7، جدول 1)، که باعث میشود نشاسته/کربوهیدراتها قابل هضمتر/در دسترستر برای لارو کرم آردآلو شوند. اینکه لارو کرم آردآلو لیپیدها را از مواد مغذی مانند کربوهیدرات ها سنتز می کند بسیار جالب است و باید در مطالعات آینده به طور کامل مورد بررسی قرار گیرد. مطالعه قبلی در مورد تأثیر pH جیره مرطوب بر رشد لارو کرم آردآلو نتیجه گرفت که هیچ تفاوت معنی داری در هنگام استفاده از بلوک های آگار با جیره های مرطوب در محدوده pH 3 تا 9 مشاهده نشد. این نشان می دهد که جیره های مرطوب تخمیری می توانند برای کشت استفاده شوند. Tenebrio molitor53. شبیه به کودرون و همکاران 53، آزمایشهای کنترلی از بلوکهای آگار در جیرههای مرطوب ارائهشده استفاده کردند، زیرا از نظر مواد معدنی و مواد مغذی کمبود داشتند. مطالعه آنها تأثیر منابع غذایی مرطوب با تنوع غذایی بیشتر مانند سبزیجات یا سیب زمینی را بر بهبود قابلیت هضم یا فراهمی زیستی بررسی نکرد. مطالعات بیشتر در مورد اثرات تخمیر منابع غذایی مرطوب بر روی لارو کرم آردآلو برای بررسی بیشتر این نظریه مورد نیاز است.
توزیع مواد معدنی زیست توده کرم آردآلوی کنترل یافت شده در این مطالعه (جدول 2 و 3) با طیف مواد مغذی درشت و ریز مغذی موجود در مقالات 48،54،55 قابل مقایسه است. تهیه کرم های آرد با ریشه کاسنی تخمیر شده به عنوان یک منبع غذایی مرطوب، محتوای مواد معدنی آنها را به حداکثر می رساند. اگرچه اکثر عناصر درشت و ریز مغذی در مخلوط سبزیجات و برگهای باغ بیشتر بود (جدول 2 و 3)، آنها به اندازه ریشههای کاسنی تخمیر شده بر محتوای معدنی بیوماس کرم آردآلو تأثیری نداشتند. یک توضیح احتمالی این است که مواد مغذی موجود در برگهای قلیایی باغ نسبت به سایر جیرههای مرطوب اسیدیتر در دسترس زیستی کمتری دارند (جدول 1). مطالعات قبلی لاروهای کرم آردآلو را با کاه برنج تخمیر شده تغذیه کردند و دریافتند که آنها به خوبی در این جریان فرعی رشد کردند و همچنین نشان دادند که پیش تیمار بستر توسط تخمیر باعث جذب مواد مغذی می شود. 56 استفاده از ریشه کاسنی تخمیر شده باعث افزایش محتوای کلسیم، آهن و منگنز زیست توده کرم آردآلو شد. اگرچه این جریان جانبی حاوی غلظتهای بالاتری از سایر مواد معدنی (P، منیزیم، پتاسیم، سدیم، روی و مس بود)، اما این مواد معدنی در زیست توده کرم آردآلو نسبت به شاهد بهطور معنیداری فراوانتر نبودند، که نشاندهنده انتخابپذیری جذب مواد معدنی است. افزایش محتوای این مواد معدنی در زیست توده کرم آردآلو دارای ارزش غذایی برای اهداف غذایی و خوراک است. کلسیم یک ماده معدنی ضروری است که نقش مهمی در عملکرد عصبی عضلانی و بسیاری از فرآیندهای آنزیمی مانند لخته شدن خون، تشکیل استخوان و دندان دارد. 57،58 کمبود آهن یک مشکل رایج در کشورهای در حال توسعه است و کودکان، زنان و افراد مسن اغلب آهن کافی از رژیم غذایی خود دریافت نمی کنند. اگرچه منگنز یک عنصر ضروری در رژیم غذایی انسان است و نقش اصلی را در عملکرد بسیاری از آنزیم ها ایفا می کند، مصرف بیش از حد آن می تواند سمی باشد. سطوح بالاتر منگنز در کرم های خوراکی تغذیه شده با ریشه کاسنی تخمیر شده نگران کننده نبود و با مرغ ها قابل مقایسه بود. 59
غلظت فلزات سنگین موجود در جریان کناری کمتر از استانداردهای اروپایی برای غذای کامل حیوانات بود. تجزیه و تحلیل فلزات سنگین لارو کرم آردآلو نشان داد که سطح سرب و کروم در کرم های تغذیه شده با ریشه کاسنی تخمیر شده به طور قابل توجهی بالاتر از گروه شاهد و سایر بسترها بود (جدول 4). ریشه های کاسنی در خاک رشد می کنند و فلزات سنگین را جذب می کنند، در حالی که سایر جریان های جانبی از تولید غذای کنترل شده انسان سرچشمه می گیرند. کرم های خوراکی تغذیه شده با ریشه کاسنی تخمیر شده نیز حاوی سطوح بالاتری از سرب و کروم بودند (جدول 4). فاکتورهای تجمع زیستی محاسبه شده (BAF) برای سرب 66/2 و برای کروم 14/1 بود، یعنی بیشتر از 1 که نشان میدهد کرمهای خوراکی توانایی تجمع فلزات سنگین را دارند. با توجه به سرب، اتحادیه اروپا حداکثر مقدار سرب را 0.10 میلی گرم برای هر کیلوگرم گوشت تازه برای مصرف انسان تعیین می کند. در ارزیابی دادههای تجربی، حداکثر غلظت سرب یافت شده در کرمهای تخمیر شده ریشه کاسنی 0.11 میلیگرم در 100 گرم DM بود. هنگامی که مقدار به مقدار ماده خشک 30.8٪ برای این کرمهای آردآلو محاسبه شد، محتوای سرب 0.034 میلیگرم بر کیلوگرم ماده تازه بود که کمتر از حداکثر سطح mg/kg 0.10 بود. حداکثر محتوای کروم در مقررات غذایی اروپا مشخص نشده است. کروم معمولاً در محیط زیست، مواد غذایی و افزودنی های غذایی یافت می شود و به عنوان یک ماده مغذی ضروری برای انسان در مقادیر کم شناخته شده است 62،63،64. این تجزیه و تحلیل ها (جدول 4) نشان می دهد که لاروهای T. molitor می توانند فلزات سنگین را در صورت وجود فلزات سنگین در جیره جمع کنند. با این حال، سطوح فلزات سنگین موجود در بیوماس کرم آردآلو در این مطالعه برای مصرف انسان ایمن در نظر گرفته شده است. هنگام استفاده از جریان های جانبی که ممکن است حاوی فلزات سنگین به عنوان منبع تغذیه مرطوب برای T. molitor باشند، نظارت منظم و دقیق توصیه می شود.
فراوان ترین اسیدهای چرب در زیست توده کل لارو T. molitor عبارتند از: پالمتیک اسید (C16:0)، اسید اولئیک (C18:1) و اسید لینولئیک (C18:2) (جدول 5) که با مطالعات قبلی مطابقت دارد. روی تی مولیتور. نتایج طیف اسیدهای چرب 36،46،50،65 سازگار است. مشخصات اسید چرب T. molitor به طور کلی از پنج جزء اصلی تشکیل شده است: اولئیک اسید (C18:1)، اسید پالمیتیک (C16:0)، اسید لینولئیک (C18:2)، اسید میریستیک (C14:0) و اسید استئاریک. (C18:0). اسید اولئیک به عنوان فراوان ترین اسید چرب (30 تا 60 درصد) در لارو کرم آردآلو گزارش شده است و پس از آن اسید پالمیتیک و اسید لینولئیک 22،35،38،39 قرار دارند. مطالعات قبلی نشان دادهاند که این پروفایل اسید چرب تحت تأثیر رژیم لارو کرم آردآلو است، اما تفاوتها از روند مشابه رژیم غذایی پیروی نمیکنند. در مقایسه با سایر پروفایل های اسید چرب، نسبت C18:1-C18:2 در پوست کندن سیب زمینی معکوس است. نتایج مشابهی برای تغییرات در پروفایل اسیدهای چرب کرمهایی که با پوست سیبزمینی بخارپز شده تغذیه میشوند، به دست آمد. این نتایج نشان می دهد که اگرچه مشخصات اسیدهای چرب روغن کرم آردآلو ممکن است تغییر کند، اما همچنان منبع غنی از اسیدهای چرب غیراشباع باقی می ماند.
هدف از این مطالعه بررسی تأثیر استفاده از چهار جریان مختلف زباله زیستی کشاورزی و صنعتی به عنوان خوراک مرطوب بر ترکیب کرمهای آردآلو بود. تاثیر بر اساس ارزش غذایی لارو ارزیابی شد. نتایج نشان داد که محصولات فرعی با موفقیت به زیست توده غنی از پروتئین (محتوای پروتئین 40.7-52.3٪) تبدیل شدند که می تواند به عنوان منبع غذایی و خوراک مورد استفاده قرار گیرد. علاوه بر این، این مطالعه نشان داد که استفاده از محصولات جانبی به عنوان خوراک مرطوب بر ارزش غذایی زیست توده کرم آردآلو تأثیر می گذارد. به طور خاص، ارائه لاروها با غلظت بالای کربوهیدرات (مثلاً برش سیب زمینی) باعث افزایش محتوای چربی و تغییر ترکیب اسیدهای چرب آنها می شود: محتوای کمتر اسیدهای چرب چند غیر اشباع و محتوای بیشتر اسیدهای چرب اشباع و تک غیراشباع، اما غلظت اسیدهای چرب غیراشباع نیست. . اسیدهای چرب (تک غیراشباع + چند غیراشباع) همچنان غالب هستند. این مطالعه همچنین نشان داد که کرمهای خوراکی به طور انتخابی کلسیم، آهن و منگنز را از جریانهای جانبی غنی از مواد معدنی اسیدی جمعآوری میکنند. به نظر می رسد فراهمی زیستی مواد معدنی نقش مهمی ایفا می کند و مطالعات بیشتری برای درک کامل این موضوع مورد نیاز است. فلزات سنگین موجود در جریان های جانبی ممکن است در کرم های آرد انباشته شوند. با این حال، غلظت نهایی سرب، کادمیوم و کروم در زیست توده لارو کمتر از حد قابل قبول بود، که به این جریانهای جانبی اجازه میدهد تا با خیال راحت به عنوان منبع تغذیه مرطوب استفاده شوند.
لاروهای کرم آردآلو توسط Radius (Giel، بلژیک) و Inagro (Rumbeke-Beitem، بلژیک) در دانشگاه علوم کاربردی توماس مور در دمای 27 درجه سانتی گراد و رطوبت نسبی 60 درصد پرورش داده شدند. تراکم کرمهای خوراکی پرورشیافته در آکواریوم 60×40 سانتیمتری 17/4 کرم بر سانتیمتر مربع (10000 کرم آرد) بود. لاروها در ابتدا با 2.1 کیلوگرم سبوس گندم به عنوان غذای خشک در هر مخزن پرورش تغذیه شدند و سپس در صورت نیاز مکمل شدند. از بلوک های آگار به عنوان یک درمان غذای مرطوب کنترلی استفاده کنید. از هفته 4 شروع به تغذیه جریان های جانبی (همچنین منبع رطوبت) به عنوان غذای مرطوب به جای آگار آزاد کنید. درصد ماده خشک برای هر جریان جانبی از قبل تعیین و ثبت شد تا از مقادیر مساوی رطوبت برای همه حشرات در سراسر تیمارها اطمینان حاصل شود. غذا به طور مساوی در سراسر تراریوم توزیع می شود. لاروها با ظهور اولین شفیره ها در گروه آزمایش جمع آوری می شوند. برداشت لارو با استفاده از شیکر مکانیکی به قطر 2 میلی متر انجام می شود. به جز آزمایش سیب زمینی خرد شده. بخشهای بزرگی از سیبزمینی خشک خرد شده نیز با اجازه دادن به لاروها از میان این توری خزیدن و جمعآوری آنها در سینیهای فلزی جدا میشوند. وزن کل برداشت با توزین وزن کل برداشت تعیین می شود. بقا با تقسیم وزن کل برداشت بر وزن لارو محاسبه می شود. وزن لارو با انتخاب حداقل 100 لارو و تقسیم وزن کل آنها بر تعداد تعیین می شود. لاروهای جمع آوری شده به مدت 24 ساعت گرسنه می مانند تا روده خود را قبل از تجزیه و تحلیل تخلیه کنند. در نهایت لاروها دوباره غربال می شوند تا از بقیه جدا شوند. آنها منجمد و معدوم شده و تا زمان تجزیه و تحلیل در دمای 18- درجه سانتیگراد نگهداری می شوند.
خوراک خشک سبوس گندم (بلژیکی Molens Joye) بود. سبوس گندم از قبل به اندازه ذرات کمتر از 2 میلی متر الک شد. لارو کرم آردآلو علاوه بر خوراک خشک، برای حفظ رطوبت و مکملهای معدنی مورد نیاز کرمهای خوراکی نیز به غذای مرطوب نیاز دارد. خوراک مرطوب بیش از نیمی از کل خوراک را تشکیل می دهد (خوراک خشک + خوراک مرطوب). در آزمایشات ما از آگار (Brouwland، بلژیک، 25 گرم در لیتر) به عنوان خوراک مرطوب کنترل استفاده شد. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، چهار محصول جانبی کشاورزی با محتوای مواد مغذی مختلف به عنوان خوراک مرطوب برای لارو کرم آردآلو مورد آزمایش قرار گرفتند. این محصولات جانبی عبارتند از (الف) برگ های حاصل از کشت خیار (ایناگرو، بلژیک)، (ب) پیرایش سیب زمینی (Duigny، بلژیک)، (ج) ریشه کاسنی تخمیر شده (ایناگرو، بلژیک) و (د) میوه و سبزیجات فروخته نشده از حراج. . (بلورتا، بلژیک). جریان کناری به قطعات مناسب برای استفاده به عنوان تغذیه کرم آردآلود خرد می شود.
محصولات جانبی کشاورزی به عنوان خوراک مرطوب برای کرم های آرد. (الف) برگ باغ از کشت خیار، (ب) قلمه سیب زمینی، (ج) ریشه کاسنی، (د) سبزیجات فروخته نشده در حراج و (ه) بلوک آگار. به عنوان کنترل
ترکیب خوراک و لارو کرم آردآلو سه بار (n = 3) تعیین شد. تجزیه و تحلیل سریع، ترکیب معدنی، محتوای فلزات سنگین و ترکیب اسیدهای چرب مورد ارزیابی قرار گرفت. نمونه همگن 250 گرمی از لاروهای جمع آوری شده و گرسنه گرفته شد، در دمای 60 درجه سانتی گراد تا وزن ثابت خشک شد، آسیاب (IKA، Tube mill 100) و از طریق الک 1 میلی متری الک شد. نمونه های خشک شده در ظروف تیره بسته شدند.
مقدار ماده خشک (DM) با خشک کردن نمونه ها در کوره 105 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت (Memmert، UF110) تعیین شد. درصد ماده خشک بر اساس کاهش وزن نمونه محاسبه شد.
محتوای خاکستر خام (CA) با از دست دادن جرم در طی احتراق در یک کوره صدا خفه کن (Nabertherm، L9/11/SKM) در دمای 550 درجه سانتی گراد به مدت 4 ساعت تعیین شد.
استخراج محتوای چربی خام یا دی اتیل اتر (EE) با نفت اتر (bp 40-60 درجه سانتی گراد) با استفاده از تجهیزات استخراج سوکسله انجام شد. تقریباً 10 گرم نمونه در سر استخراج قرار داده شد و با پشم سرامیک پوشانده شد تا از هدر رفتن نمونه جلوگیری شود. نمونه ها در طول شب با 150 میلی لیتر پترولیوم اتر استخراج شدند. عصاره سرد شد، حلال آلی حذف شد و با تبخیر چرخشی (Büchi, R-300) در 300 میلیبار و 50 درجه سانتیگراد بازیابی شد. عصاره های لیپیدی یا اتری خام سرد شده و بر روی یک ترازوی تحلیلی وزن شدند.
محتوای پروتئین خام (CP) با تجزیه و تحلیل نیتروژن موجود در نمونه با استفاده از روش Kjeldahl BN EN ISO 5983-1 (2005) تعیین شد. برای محاسبه میزان پروتئین از فاکتورهای مناسب N تا P استفاده کنید. برای خوراک خشک استاندارد (سبوس گندم) از ضریب کل 25/6 استفاده کنید. برای جریان جانبی از ضریب 4.2366 و برای مخلوط سبزیجات از ضریب 4.3967 استفاده می شود. محتوای پروتئین خام لارو با استفاده از فاکتور N به P 5.3351 محاسبه شد.
محتوای فیبر شامل تعیین فیبر شوینده خنثی (NDF) بر اساس پروتکل استخراج Gerhardt (تحلیل دستی فیبر در کیسه ها، Gerhardt، آلمان) و روش van Soest 68 بود. برای تعیین NDF، یک نمونه 1 گرمی در یک کیسه فیبر مخصوص (کیسه Gerhardt، ADF/NDF) با آستر شیشه ای قرار داده شد. کیسه های الیاف پر شده با نمونه ها ابتدا با نفت اتر (نقطه جوش 60-40 درجه سانتیگراد) چربی زدایی شدند و سپس در دمای اتاق خشک شدند. نمونه بدون چربی با محلول شوینده فیبر خنثی حاوی α-آمیلاز پایدار در برابر حرارت در دمای جوش به مدت 1.5 ساعت استخراج شد. سپس نمونه ها سه بار با آب جوشانده شده شسته و در دمای 105 درجه سانتیگراد به مدت یک شب خشک شدند. کیسه های الیاف خشک (حاوی بقایای الیاف) با استفاده از ترازوی تحلیلی (Sartorius, P224-1S) وزن شدند و سپس در کوره صدا خفه کن (Nabertherm, L9/11/SKM) در دمای 550 درجه سانتی گراد به مدت 4 ساعت سوزانده شدند. خاکستر مجدداً وزن شده و محتوای الیاف بر اساس کاهش وزن بین خشک شدن و سوزاندن نمونه محاسبه شد.
برای تعیین محتوای کیتین لاروها، از یک پروتکل اصلاح شده بر اساس تجزیه و تحلیل الیاف خام توسط van Soest 68 استفاده کردیم. نمونه 1 گرمی در یک کیسه فیبر مخصوص (Gerhardt, CF Bag) و یک مهر و موم شیشه ای قرار داده شد. نمونه ها در کیسه های الیافی بسته بندی شدند، در اتر نفتی (حدود 40 تا 60 درجه سانتیگراد) چربی زدایی شده و در هوا خشک شدند. نمونه بدون چربی ابتدا با محلول اسیدی 0.13 مولار اسید سولفوریک در دمای جوش به مدت 30 دقیقه استخراج شد. کیسه فیبر استخراجی حاوی نمونه سه بار با آب جوشانده شده شسته و سپس با محلول هیدروکسید پتاسیم 0.23 مولار به مدت 2 ساعت استخراج شد. کیسه فیبر استخراجی حاوی نمونه مجدداً سه بار با آب جوشانده شده شستشو داده شد و در دمای 105 درجه سانتیگراد یک شبه خشک شد. کیسه خشک حاوی باقیمانده الیاف بر روی یک ترازوی تحلیلی وزن شده و در کوره صدا خفه کن در دمای 550 درجه سانتیگراد به مدت 4 ساعت سوزانده شد. خاکستر وزن شده و محتوای فیبر بر اساس کاهش وزن نمونه سوزانده شده محاسبه شد.
محتوای کربوهیدرات کل محاسبه شد. غلظت کربوهیدرات غیر فیبری (NFC) در خوراک با استفاده از آنالیز NDF و غلظت حشره با استفاده از آنالیز کیتین محاسبه شد.
pH ماتریکس پس از استخراج با آب دیونیزه (1:5 v/v) مطابق NBN EN 15933 تعیین شد.
نمونه ها همانطور که توسط Broeckx و همکارانش توضیح داده شد آماده شدند. پروفایل های معدنی با استفاده از ICP-OES (Optima 4300™ DV ICP-OES، Perkin Elmer، MA، USA) تعیین شد.
فلزات سنگین Cd، Cr و Pb توسط طیفسنجی جذب اتمی کوره گرافیت (AAS) (Thermo Scientific، سری ICE 3000، مجهز به نمونهبر خودکار کوره GFS) آنالیز شدند. حدود 200 میلی گرم از نمونه در HNO3/HCl اسیدی (1:3 v/v) با استفاده از امواج مایکروویو (CEM، MARS 5) هضم شد. هضم مایکروویو در دمای 190 درجه سانتیگراد به مدت 25 دقیقه در 600 وات انجام شد. عصاره را با آب فوق خالص رقیق کنید.
اسیدهای چرب توسط GC-MS (Agilent Technologies، سیستم GC 7820A با آشکارساز 5977 E MSD) تعیین شدند. طبق روش جوزف و اکمن70، محلول 20% BF3/MeOH به محلول متانولی KOH اضافه شد و متیل استر اسید چرب (FAME) از عصاره اتری پس از استری شدن به دست آمد. اسیدهای چرب را می توان با مقایسه زمان نگهداری آنها با 37 استاندارد مخلوط FAME (آزمایشگاه شیمیایی) یا با مقایسه طیف MS آنها با کتابخانه های آنلاین مانند پایگاه داده NIST شناسایی کرد. تجزیه و تحلیل کیفی با محاسبه مساحت پیک به عنوان درصدی از کل مساحت پیک کروماتوگرام انجام می شود.
تجزیه و تحلیل داده ها با استفاده از نرم افزار JMP Pro 15.1.1 از SAS (Buckinghamshire، UK) انجام شد. ارزیابی با استفاده از تحلیل واریانس یک طرفه با سطح معنی داری 05/0 و Tukey HSD به عنوان آزمون تعقیبی انجام شد.
فاکتور تجمع زیستی (BAF) با تقسیم غلظت فلزات سنگین در زیست توده لارو کرم آردآلو (DM) بر غلظت در خوراک مرطوب (DM) 43 محاسبه شد. BAF بیشتر از 1 نشان می دهد که فلزات سنگین از خوراک مرطوب در لارو تجمع می یابند.
مجموعه دادههای تولید شده و/یا تجزیهوتحلیلشده در طول مطالعه جاری در صورت درخواست معقول از نویسنده مربوطه در دسترس است.
اداره امور اقتصادی و اجتماعی سازمان ملل متحد، بخش جمعیت. چشم انداز جمعیت جهان 2019: نکات برجسته (ST/ESA/SER.A/423) (2019).
Cole، MB، Augustine، MA، Robertson، MJ، و Manners، JM، علم ایمنی مواد غذایی. NPJ Sci. Food 2018, 2. https://doi.org/10.1038/s41538-018-0021-9 (2018).
زمان ارسال: دسامبر-19-2024