A közönséges oldható szénhidrátok befolyásolják a Hermetia illucens (Stratiomyidae) fekete katonalégylárvák növekedését, túlélését és zsírsavprofilját.

Köszönjük, hogy meglátogatta a Nature.com oldalt. Az Ön által használt böngészőverzió korlátozott CSS-támogatással rendelkezik. A legjobb eredmény érdekében javasoljuk, hogy használjon újabb böngészőt (vagy kapcsolja ki a kompatibilitási módot az Internet Explorerben). Addig is a folyamatos támogatás érdekében a webhelyet stílusok és JavaScript nélkül jelenítjük meg.
A fekete katonalégy (Hermetia illucens, L. 1758) egy mindenevő, detritivo rovar, amely nagy potenciállal rendelkezik a szénhidrátban gazdag szerves melléktermékek hasznosítására. A szénhidrátok közül a fekete katonalegyek az oldható cukrokra támaszkodnak a növekedéshez és a lipidszintézishez. A tanulmány célja az volt, hogy értékelje a közönséges oldható cukrok hatását a fekete katonalegyek fejlődésére, túlélésére és zsírsavprofiljára. A csirke takarmányt külön-külön monoszacharidokkal és diszacharidokkal egészítse ki. Kontrollként cellulózt használtunk. A glükózzal, fruktózzal, szacharózzal és maltózzal táplált lárvák gyorsabban növekedtek, mint a kontrolllárvák. Ezzel szemben a laktóz táplálékellenes hatással volt a lárvákra, lassította a növekedést és csökkentette az egyed végső testsúlyát. Azonban minden oldható cukor kövérebbé tette a lárvákat, mint a kontrolltáppal táplált lárvákat. Nevezetesen, a vizsgált cukrok alakították a zsírsavprofilt. A maltóz és a szacharóz növelte a telített zsírsavtartalmat a cellulózhoz képest. Ezzel szemben a laktóz növelte a táplálékkal felvett telítetlen zsírsavak bioakkumulációját. Ez a tanulmány az első, amely bemutatja az oldható cukor hatását a fekete katonalégylárvák zsírsavösszetételére. Eredményeink azt mutatják, hogy a vizsgált szénhidrátok szignifikáns hatással vannak a fekete katonalégy lárvák zsírsavösszetételére, így meghatározhatják végső felhasználásukat.
Továbbra is növekszik az energia és az állati fehérje iránti globális kereslet1. A globális felmelegedéssel összefüggésben elengedhetetlen, hogy a termelés növelése mellett zöldebb alternatívákat találjunk a fosszilis energia és a hagyományos élelmiszer-előállítási módszerek helyett. A rovarok ígéretes jelöltek ezeknek a problémáknak a megoldására a hagyományos állattenyésztéshez képest alacsonyabb kémiai összetételük és környezeti hatásuk miatt2. A rovarok közül ezeknek a problémáknak a megoldására kiváló jelölt a fekete katonalégy (BSF), a Hermetia illucens (L. 1758), egy törmelékevő faj, amely különféle szerves anyagokkal képes táplálkozni3. Ezért ezeknek a szubsztrátumoknak a BSF-tenyésztéssel történő felértékelése új nyersanyagforrást teremthet a különféle iparágak igényeinek kielégítésére.
A BSF lárvák (BSFL) olyan mezőgazdasági és agráripari melléktermékekkel táplálkozhatnak, mint a sörgyári gabona, növényi maradványok, gyümölcspép és állott kenyér, amelyek magas szénhidráttartalmuk (CH)4,5 miatt különösen alkalmasak a BSFL növekedésére, 6 tartalom. A BSFL nagyüzemi előállítása során két termék keletkezik: ürülék, szubsztrátummaradványok és ürülék keveréke, amely növénytermesztéshez műtrágyaként használható7, valamint lárvák, amelyek főleg fehérjékből, lipidekből és kitinből állnak. A fehérjéket és lipideket főleg az állattenyésztésben, a bioüzemanyagban és a kozmetikumokban használják8,9. Ami a kitint illeti, ezt a biopolimert az agrár-élelmiszeripari ágazatban, a biotechnológiában és az egészségügyben alkalmazzák10.
A BSF egy autogén holometabolus rovar, ami azt jelenti, hogy metamorfózisát és szaporodását, különösen a rovar életciklusának energiaigényes szakaszait teljes mértékben támogatják a lárvák növekedése során keletkező tápanyagtartalékok11. Pontosabban, a fehérje- és lipidszintézis a zsírtest kialakulásához vezet, egy fontos raktározó szervhez, amely energiát szabadít fel a BSF nem táplálkozási szakaszaiban: a prepupa (azaz az utolsó lárvaállapot, amely során a BSF lárvák feketévé válnak táplálkozás és keresés közben). metamorfózisra alkalmas környezetre), bábokra (azaz a nem mozgó stádiumra, amely során a rovar metamorfózison megy keresztül) és imágókra12,13. A CH a fő energiaforrás a BSF14 étrendjében. Ezen tápanyagok közül a rostos CH-t, például a hemicellulózt, a cellulózt és a lignint, a diszacharidokkal és poliszacharidokkal (például keményítővel) ellentétben a BSFL15,16 nem tudja megemészteni. A CH emésztése fontos előzetes lépés a szénhidrátok felszívódásához, amelyek végül egyszerű cukrokká hidrolizálódnak a bélben16. Az egyszerű cukrok ezután felszívódnak (azaz a bél peritrofikus membránján keresztül) és metabolizálódnak, hogy energiát állítsanak elő17. Mint fentebb említettük, a lárvák a felesleges energiát lipidek formájában tárolják a zsírtestben12,18. A tároló lipidek trigliceridekből (egy glicerinmolekulából és három zsírsavból képződő semleges lipidekből) állnak, amelyeket a lárvák szintetizálnak az étkezési egyszerű cukrokból. Ezek a CH-k biztosítják a zsírsav (FA) bioszintéziséhez szükséges acetil-CoA szubsztrátokat a zsírsav szintáz és tioészteráz útvonalakon keresztül19. A H. illucens lipidek zsírsavprofiljában természetesen a telített zsírsavak (SFA) dominálnak, amelyek nagy arányban tartalmaznak laurinsavat (C12:0)19,20. Ezért a magas lipidtartalom és zsírsav-összetétel gyorsan korlátozó tényezővé válik a teljes lárvák állati takarmányban való felhasználásában, különösen az akvakultúrában, ahol többszörösen telítetlen zsírsavakra (PUFA) van szükség21.
Amióta felfedezték a BSFL-ben rejlő potenciált a szerves hulladék csökkentésében, a különböző melléktermékek értékét vizsgáló tanulmányok kimutatták, hogy a BSFL összetételét részben az étrend szabályozza. Jelenleg a H. illucens FA profiljának szabályozása folyamatosan javul. A BSFL azon képességét, hogy bioakkumulálja a PUFA-t, kimutatták PUFA-ban gazdag szubsztrátumokon, például algákon, halhulladékokon vagy liszteken, például lenmagokon, ami magasabb minőségű FA-profilt biztosít az állati takarmányozáshoz19,22,23. Ezzel szemben a PUFA-ban nem dúsított melléktermékek esetében nem mindig van összefüggés az étrendi FA-profilok és a lárvák FA-ja között, ami más tápanyagok hatását jelzi24,25. Valójában az emészthető CH hatása az FA-profilokra továbbra is rosszul ismert és alulkutatott 24, 25, 26, 27.
Legjobb tudomásunk szerint bár az összes monoszacharid és diszacharid bőséges a H. illucens étrendjében, táplálkozási szerepük továbbra is kevéssé ismert a H. illucens táplálkozásában. A tanulmány célja a BSFL táplálkozására és lipidösszetételére gyakorolt ​​hatásuk tisztázása volt. Értékelni fogjuk a lárvák növekedését, túlélését és termelékenységét különböző táplálkozási körülmények között. Ezután leírjuk az egyes étrendek lipidtartalmát és zsírsavprofilját, hogy kiemeljük a CH hatását a BSFL táplálkozási minőségére.
Feltételeztük, hogy a vizsgált CH természete befolyásolja (1) a lárva növekedését, (2) az összes lipidszintet és (3) módosítja az FA profilt. A monoszacharidok közvetlenül felszívódhatnak, míg a diszacharidokat hidrolizálni kell. A monoszacharidok így jobban elérhetők közvetlen energiaforrásként vagy prekurzorként a lipogenezishez az FA-szintáz és tioészteráz útvonalakon keresztül, ezáltal fokozzák a H. illucens lárva növekedését és elősegítik a tartalék lipidek (különösen a laurinsav) felhalmozódását.
A vizsgált CH befolyásolta a lárvák átlagos testtömegét a növekedés során (1. ábra). A FRU, a GLU, a SUC és a MAL a kontroll étrendhez (CEL) hasonlóan növelte a lárva testtömegét. Ezzel szemben a LAC és a GAL késlelteti a lárvafejlődést. Nevezetesen, a LAC szignifikáns negatív hatással volt a lárva növekedésére a SUC-hoz képest a növekedési periódus során: 9,16 ± 1,10 mg versus 15,00 ± 1,01 mg a 3. napon (F6,21 = 12,77, p < 0,001; 1. ábra), 125,16 ± 4. mg és 211,79 ± 14,93 mg, illetve a 17. napon (F6,21 = 38,57, p < 0,001; 1. ábra).
Kontrollként különböző monoszacharidokat (fruktóz (FRU), galaktóz (GAL), glükóz (GLU)), diszacharidokat (laktóz (LAC), maltóz (MAL), szacharóz (SUC)) és cellulózt (CEL) használunk. Fekete katonalégylárvákkal táplált lárvák növekedése. A görbe minden pontja a 100 lárvából álló populációból (n = 4) 20 véletlenszerűen kiválasztott lárva lemérésével számított átlagos egyedsúlyt (mg). A hibasávok az SD-t jelölik.
A CEL-diéta kiváló, 95,5 ± 3,8%-os lárva túlélést biztosított. Ezen túlmenően az oldható CH-t tartalmazó H. illucens táplálékok túlélése csökkent (GLM: χ = 107,13, df = 21, p < 0,001), amit a MAL és a SUC (disacharidok) okozott a vizsgált CH-ban. A mortalitás alacsonyabb volt, mint a GLU, FRU, GAL (monoszacharid) és LAC esetében (EMM: p < 0,001, 2. ábra).
Különböző monoszacharidokkal (fruktóz, galaktóz, glükóz), diszacharidokkal (laktóz, maltóz, szacharóz) és cellulózzal kezelt fekete katonalégy lárvák túlélési keretrajza. Az azonos betűs kezelések nem különböznek szignifikánsan egymástól (EMM, p > 0,05).
Minden tesztelt étrend lehetővé tette a lárvák számára, hogy elérjék a báb előtti állapotot. A vizsgált CH-k azonban hajlamosak voltak megnyújtani a lárvafejlődést (F6,21=9,60, p<0,001; 1. táblázat). Különösen a GAL-lal és LAC-val táplált lárvák hosszabb ideig tartottak a prepupal állapot eléréséhez, mint a CEL-en nevelt lárvák (CEL-GAL: p<0,001; CEL-LAC: p<0,001; 1. táblázat).
A vizsgált CH a lárva testtömegére is eltérő hatással volt, a CEL-táppal táplált lárvák testtömege elérte a 180,19 ± 11,35 mg-ot (F6,21 = 16,86, p < 0,001; 3. ábra). A FRU, GLU, MAL és SUC 200 mg-ot meghaladó átlagos végső lárva testtömeget eredményezett, ami szignifikánsan magasabb, mint a CEL (p < 0,05). Ezzel szemben a GAL-lal és LAC-val táplált lárvák testtömege alacsonyabb volt, átlagosan 177,64 ± 4,23 mg és 156,30 ± 2,59 mg (p < 0,05). Ez a hatás kifejezettebb volt a LAC-nál, ahol a végső testtömeg alacsonyabb volt, mint a kontroll étrendnél (CEL-LAC: különbség = 23,89 mg; p = 0,03; 3. ábra).
A különböző monoszacharidokkal (fruktóz, galaktóz, glükóz), diszacharidokkal (laktóz, maltóz, szacharóz) és cellulózzal (kontrollként) táplált egyedi lárvák átlagos végső tömege lárvafoltokban (mg) és hisztogramban kifejezett fekete katonalegyek (g). Az oszlopos betűk a teljes lárvatömegben szignifikánsan eltérő csoportokat jelölik (p < 0,001). A lárvafoltokhoz kapcsolódó betűk szignifikánsan eltérő egyéni lárvatömegű csoportokat jelentenek (p < 0,001). A hibasávok az SD-t jelölik.
A maximális egyedi tömeg független volt a lárvakolónia maximális végső össztömegétől. Valójában a FRU-t, GLU-t, MAL-t és SUC-t tartalmazó étrendek nem növelték a tartályban termelt összlárva tömegét a CEL-hez képest (3. ábra). A LAC azonban szignifikánsan csökkentette az össztömeget (CEL-LAC: különbség = 9,14 g; p < 0,001; 3. ábra).
Az 1. táblázat mutatja a termést (lárvák/nap). Érdekes módon a CEL, MAL és SUC optimális hozama hasonló volt (1. táblázat). Ezzel szemben a FRU, GAL, GLU és LAC csökkentette a hozamot a CEL-hez képest (1. táblázat). A GAL és a LAC teljesített a legrosszabbul: a hozam felére csökkent, mindössze 0,51 ± 0,09 g lárva/nap, illetve 0,48 ± 0,06 g lárva/nap (1. táblázat).
A monoszacharidok és diszacharidok növelték a CF lárvák lipidtartalmát (1. táblázat). A CLE diétán a DM tartalom 23,19 ± 0,70%-a lipidtartalmú lárvákat kaptunk. Összehasonlításképpen, az oldható cukorral táplált lárvák átlagos lipidtartalma több mint 30% volt (1. táblázat). A vizsgált CH-k ugyanakkor ugyanolyan mértékben növelték zsírtartalmukat.
Ahogy az várható volt, a CG alanyok különböző mértékben befolyásolták a lárvák FA profilját (4. ábra). Az SFA-tartalom minden étrendben magas volt, és elérte a 60%-ot. A MAL és a SUC kiegyensúlyozták az FA-profilt, ami az SFA-tartalom növekedéséhez vezetett. A MAL esetében ez az egyensúlyhiány egyrészt az egyszeresen telítetlen zsírsavak (MUFA) tartalmának csökkenéséhez vezetett (F6,21 = 7,47; p < 0,001; 4. ábra). Másrészt a SUC esetében a csökkenés egyenletesebb volt a MUFA és a PUFA között. A LAC és a MAL ellentétes hatást fejtett ki az FA-spektrumra (SFA: F6,21 = 8,74; p < 0,001; MUFA: F6,21 = 7,47; p < 0,001; PUFA: χ2 = 19,60; Df = 6; p < 0,001; ábra 4). Úgy tűnik, hogy az SFA alacsonyabb aránya a LAC-val táplált lárvákban növeli a MUFA-tartalmat. Különösen a MUFA-szint magasabb volt a LAC-val táplált lárvákban, mint a GAL kivételével más oldható cukrok (F6,21 = 7,47; p < 0,001; 4. ábra).
Különböző monoszacharidok (fruktóz (FRU), galaktóz (GAL), glükóz (GLU)), diszacharidok (laktóz (LAC), maltóz (MAL), szacharóz (SUC)) és cellulóz (CEL) felhasználásával kontrollként, a zsírsavak dobozdiagramja fekete katonalégylárvákkal táplált összetétel. Az eredményeket a teljes FAME százalékában fejezzük ki. A különböző betűkkel jelölt kezelések szignifikánsan különböznek egymástól (p < 0,001). a) Telített zsírsavak aránya; b) egyszeresen telítetlen zsírsavak; c) többszörösen telítetlen zsírsavak.
Az azonosított zsírsavak közül a laurinsav (C12:0) volt a domináns minden megfigyelt spektrumban (több mint 40%). További jelen lévő SFA-k a palmitinsav (C16:0) (kevesebb mint 10%), a sztearinsav (C18:0) (kevesebb, mint 2,5%) és a kaprinsav (C10:0) (kevesebb, mint 1,5%). A MUFA-kat főként olajsav (C18:1n9) képviselte (kevesebb, mint 9,5%), míg a PUFA-k főleg linolsavból (C18:2n6) (kevesebb, mint 13,0%) (lásd az S1 kiegészítő táblázatot). Ezenkívül a vegyületek kis hányadát nem lehetett azonosítani, különösen a CEL lárvák spektrumában, ahol az azonosítatlan 9-es számú vegyület (UND9) átlagosan 2, 46 ± 0, 52% -ot tett ki (lásd az S1 kiegészítő táblázatot). A GC × GC-FID elemzés azt sugallta, hogy ez egy 20 szénatomos zsírsav lehet, öt vagy hat kettős kötéssel (lásd az S5 kiegészítő ábrát).
A PERMANOVA analízis három különálló csoportot tárt fel a zsírsavprofilok alapján (F6,21 = 7,79, p < 0,001; 5. ábra). A TBC-spektrum főkomponens-analízise (PCA) ezt szemlélteti, és két komponenssel magyarázza (5. ábra). A fő komponensek a variancia 57,9%-át magyarázták, és fontossági sorrendben a laurinsav (C12:0), olajsav (C18:1n9), palmitinsav (C16:0), sztearinsav (C18:0), ill. linolénsav (C18:3n3) (lásd S4. ábra). A második komponens a variancia 26,3%-át magyarázta, és fontossági sorrendben tartalmazta a dekánsavat (C10:0) és a linolsavat (C18:2n6 cis) (lásd az S4 kiegészítő ábrát). Az egyszerű cukrokat (FRU, GAL és GLU) tartalmazó étrendek profilja hasonló jellemzőket mutatott. Ezzel szemben a diszacharidok különböző profilokat adtak: egyrészt MAL és SUC, másrészt LAC. Különösen a MAL volt az egyetlen cukor, amely megváltoztatta az FA-profilt a CEL-hez képest. Ezenkívül a MAL profil szignifikánsan különbözött az FRU és a GLU profiloktól. Különösen a MAL-profil mutatta a legmagasabb C12:0 arányt (54,59 ± 2,17%), így összehasonlítható a CEL-lel (43,10 ± 5,01%), a LAC-val (43,35 ± 1,31%), az FRU-val (48,90 ± 1,97%) és a GLU (48,38 ± 2,17%) profilok (lásd a kiegészítőt S1 táblázat). A MAL spektrum mutatta a legalacsonyabb C18:1n9-tartalmat is (9,52 ± 0,50%), ami tovább különböztette meg a LAC (12,86 ± 0,52%) és a CEL (12,40 ± 1,31%) spektrumtól. Hasonló tendencia volt megfigyelhető a C16:0 esetében is. A második komponensben a LAC spektrum mutatta a legmagasabb C18:2n6 tartalmat (17,22 ± 0,46%), míg a MAL a legalacsonyabbat (12,58 ± 0,67%). A C18:2n6 a LAC-t is megkülönböztette a kontrolltól (CEL), amely alacsonyabb szintet mutatott (13,41 ± 2,48%) (lásd az S1 kiegészítő táblázatot).
A fekete katonalégylárvák zsírsavprofiljának PCA diagramja különböző monoszacharidokkal (fruktóz, galaktóz, glükóz), diszacharidokkal (laktóz, maltóz, szacharóz) és cellulózzal kontrollként.
Az oldható cukrok H. illucens lárvákra gyakorolt ​​táplálkozási hatásának tanulmányozására a csirke takarmányában a cellulózt (CEL) glükózra (GLU), fruktózra (FRU), galaktózra (GAL), malátacukor (MAL), szacharózra (SUC) és laktóz (LAC). A monoszacharidok és a diszacharidok azonban eltérő hatással voltak a HF lárvák fejlődésére, túlélésére és összetételére. Például a GLU, FRU és diszacharid formáik (MAL és SUC) pozitív támogató hatást fejtettek ki a lárvák növekedésére, lehetővé téve számukra, hogy nagyobb végső testsúlyt érjenek el, mint a CEL. Ellentétben az emészthetetlen CEL-lel, a GLU, a FRU és a SUC megkerülheti a bélgátat, és fontos tápanyagforrásként szolgálhat az összeállított étrendekben16,28. A MAL-ból hiányoznak specifikus állattranszporterek, és úgy gondolják, hogy az asszimiláció előtt két glükózmolekulává hidrolizálódik15. Ezek a molekulák a rovartestben közvetlen energiaforrásként vagy lipidekként tárolódnak18. Először is, ami az utóbbit illeti, a megfigyelt intramodális különbségek egy része a nemek arányának kismértékű eltéréséből adódik. Valójában a H. illucens esetében a szaporodás teljesen spontán lehet: a felnőtt nőstények természetesen elegendő tojásrakási tartalékkal rendelkeznek, és nehezebbek, mint a hímek29. Azonban a lipid felhalmozódása a BSFL-ben korrelál az étrendben oldható CH2 bevitellel, amint azt korábban a GLU és a xilóz esetében megfigyelték26, 30. Például Li és munkatársai30 megfigyelték, hogy amikor 8% GLU-t adtak a lárva étrendhez, a BSF lárvák lipidtartalma 7,78%-kal nőtt a kontrollokhoz képest. Eredményeink összhangban vannak ezekkel a megfigyelésekkel, és azt mutatják, hogy az oldható cukorral táplált lárvák zsírtartalma magasabb volt, mint a CEL étrenddel táplált lárvák zsírtartalma, szemben a GLU-kiegészítés 8,57%-os növekedésével. Meglepő módon hasonló eredményeket figyeltek meg a GAL-lal és LAC-val táplált lárvák esetében, annak ellenére, hogy a lárva növekedésére, végső testtömegére és túlélésére gyakorolt ​​​​káros hatások voltak. A LAC-val táplált lárvák szignifikánsan kisebbek voltak, mint a CEL-táppal etetettek, de zsírtartalmuk hasonló volt a többi oldható cukorral táplált lárvákéhoz. Ezek az eredmények rávilágítanak a laktóz táplálékellenes hatására a BSFL-re. Először is, az étrend nagy mennyiségű CH-t tartalmaz. A monoszacharidok, illetve diszacharidok abszorpciós, illetve hidrolízisrendszere telítődhet, ami szűk keresztmetszetet okoz az asszimilációs folyamatban. Ami a hidrolízist illeti, azt az α- és β-glükozidázok 31 végzik. Ezeknek az enzimeknek a méretüktől és az őket alkotó monoszacharidok közötti kémiai kötésektől (α- vagy β-kötésektől) függően előnyös szubsztrátjaik vannak15. A LAC hidrolízisét GLU-vá és GAL-lé a β-galaktozidáz, egy olyan enzim végzi, amelynek aktivitását a BSF 32 bélben kimutatták. Előfordulhat azonban, hogy kifejeződése nem elegendő a lárvák által elfogyasztott LAC mennyiségéhez képest. Ezzel szemben az α-glükozidáz maltáz és a szacharáz 15, amelyekről ismert, hogy a rovarokban bőségesen expresszálódnak, nagy mennyiségű MAL és szacharóz SUC lebontására képesek, ezáltal korlátozva ezt a telítő hatást. Másodszor, a táplálékellenes hatások oka lehet a rovarok bélrendszeri amiláz aktivitásának csökkentett stimulációja és a táplálkozási viselkedés lassulása más kezelésekhez képest. Valójában az oldható cukrokat a rovarok emésztéséhez fontos enzimaktivitás serkentőiként azonosították, mint például az amilázt, és a táplálkozási válasz kiváltóiként33, 34, 35. A stimuláció mértéke a cukor molekulaszerkezetétől függően változik. Valójában a diszacharidok hidrolízist igényelnek a felszívódás előtt, és hajlamosak jobban stimulálni az amilázt, mint az alkotó monoszacharidjaik34. Ezzel szemben a LAC enyhébb hatású, és úgy találták, hogy nem képes támogatni a rovarok növekedését különböző fajokban33,35. Például a Spodoptera exigua (Boddie 1850) kártevőnél nem mutatták ki a LAC hidrolitikus aktivitását a hernyóközépbél enzimek kivonataiban36.
Az FA spektrumot tekintve eredményeink a vizsgált CH szignifikáns moduláló hatásait jelzik. Nevezetesen, bár a laurinsav (C12:0) az étrendben lévő összes FA kevesebb mint 1%-át tette ki, minden profilban dominált (lásd az S1 kiegészítő táblázatot). Ez összhangban van azokkal a korábbi adatokkal, amelyek szerint a laurinsavat a H. illucensben a táplálék CH-ból szintetizálják egy acetil-CoA karboxiláz és FA-szintáz részvételével19, 27, 37. Eredményeink megerősítik, hogy a CEL nagyrészt emészthetetlen, és „tömegnövelő szerként” működik a BSF-kontroll étrendben, amint azt számos BSFL-tanulmány tárgyalta38,39,40. A CEL helyettesítése monoszacharidokkal és a LAC-tól eltérő diszacharidokkal növelte a C12:0 arányt, ami a lárvák fokozott CH felvételét jelzi. Érdekes módon a MAL és a SUC diszacharidok hatékonyabban segítik elő a laurinsav szintézist, mint az őket alkotó monoszacharidok, ami arra utal, hogy a GLU és FRU magasabb fokú polimerizációja ellenére, és mivel a Drosophila az egyetlen szacharóz transzporter, amelyet állati fehérjefajtákban azonosítottak, a diszacharid transzporterek nem lehet jelen a H. illucens larvae15 bélrendszerében, a GLU hasznosítása ill. Az FRU megemelkedik. Bár a GLU-t és a FRU-t elméletileg könnyebben metabolizálja a BSF, a szubsztrátok és a bélmikroorganizmusok is könnyebben metabolizálják őket, ami a diszacharidokhoz képest gyorsabb lebomlást és a lárvák általi felhasználásuk csökkenését eredményezheti.
Első pillantásra a LAC-val és MAL-lal táplált lárvák lipidtartalma összehasonlítható volt, ami e cukrok hasonló biológiai hozzáférhetőségét jelzi. Meglepő módon azonban a LAC FA profilja gazdagabb volt SFA-ban, különösen alacsonyabb C12:0 tartalommal, mint a MAL. Az egyik hipotézis, amely ezt a különbséget magyarázza, az, hogy a LAC serkentheti az étrendi FA bioakkumulációját az acetil-CoA FA-szintázon keresztül. Ezt a hipotézist alátámasztva a LAC lárvák dekanoát (C10:0) aránya a legalacsonyabb (0,77 ± 0,13%), mint a CEL-diéta (1,27 ± 0,16%), ami csökkent FA-szintáz és tioészteráz aktivitást jelez19. Másodszor, az étkezési zsírsavakat tekintik a H. illucens SFA összetételét befolyásoló fő tényezőnek27. Kísérleteinkben a linolsav (C18:2n6) az étkezési zsírsavak 54,81%-át tette ki, az arány a LAC lárvákban 17,22 ± 0,46%, a MAL-ban pedig 12,58 ± 0,67%. Az olajsav (cisz + transz C18:1n9) (23,22% az étrendben) hasonló tendenciát mutatott. Az α-linolénsav (C18:3n3) aránya is alátámasztja a bioakkumulációs hipotézist. Ismeretes, hogy ez a zsírsav felhalmozódik a BSFL-ben a szubsztrát dúsításakor, például lenmagpogácsa hozzáadásakor, a lárvák összes zsírsavának 6-9%-áig19. Dúsított étrendben a C18:3n3 az összes zsírsav 35%-át teheti ki. Vizsgálatunkban azonban a C18:3n3 a zsírsavprofilnak csak 2,51%-át tette ki. Bár a természetben talált arány alacsonyabb volt lárváinkban, ez az arány magasabb volt a LAC lárvákban (0,87 ± 0,02%), mint a MAL-ban (0,49 ± 0,04%) (p < 0,001; lásd az S1 kiegészítő táblázatot). A CEL-diéta közbenső aránya 0,72 ± 0,18% volt. Végül a palmitinsav (C16:0) aránya a CF lárvákban a szintetikus útvonalak és az étrendi FA19 hozzájárulását tükrözi. Hoc et al. 19 megfigyelte, hogy a C16:0 szintézis csökkent, amikor az étrendet lenmagliszttel dúsították, ami az acetil-CoA szubsztrát hozzáférhetőségének csökkenésének tulajdonítható a CH arány csökkenése miatt. Meglepő módon, bár mindkét diéta hasonló CH-tartalommal és a MAL magasabb biohasznosulást mutatott, a MAL lárvák mutatták a legalacsonyabb C16:0 arányt (10,46 ± 0,77%), míg a LAC magasabb arányt mutatott, 12,85 ± 0,27%-ot (p < 0,05; lásd Kiegészítő táblázat S1). Ezek az eredmények rávilágítanak a tápanyagok komplex hatására a BSFL emésztésére és anyagcseréjére. Jelenleg a Lepidoptera esetében alaposabb kutatás folyik ebben a témában, mint a kétszárnyúban. A hernyókban a LAC-t a táplálkozási viselkedés gyenge serkentőjeként azonosították, összehasonlítva más oldható cukrokkal, mint például a SUC és az FRU34,35. Különösen a Spodopteralittoralisban (Boisduval 1833) a MAL-fogyasztás nagyobb mértékben serkentette az amilolitikus aktivitást a bélben, mint a LAC34. Hasonló hatások BSFL-ben magyarázhatják a C12:0 szintézisút fokozott stimulációját MAL lárvákban, ami a megnövekedett bélben felszívódó CH-val, az elhúzódó táplálással és az intestinalis amiláz hatásával jár. A táplálkozási ritmus kevésbé serkentése LAC jelenlétében szintén magyarázhatja a LAC lárvák lassabb növekedését. Ezenkívül Liu Yanxia et al. 27 megállapították, hogy a H. illucens szubsztrátokban a lipidek eltarthatósága hosszabb volt, mint a CH-é. Ezért a LAC lárvák jobban támaszkodhatnak az étrendi lipidekre a fejlődésük befejezéséhez, ami növelheti végső lipidtartalmukat és módosíthatja zsírsavprofiljukat.
Legjobb tudomásunk szerint csak néhány tanulmány tesztelte a monoszacharidok és diszacharidok BSF-diétákhoz való hozzáadásának hatását a FA-profiljukra. Először Li és mtsai. 30 értékelte a GLU és a xilóz hatását, és a miénkhez hasonló lipidszinteket figyelt meg 8%-os adagolási sebesség mellett. Az FA-profil nem volt részletezve, és főként SFA-ból állt, de nem találtunk különbséget a két cukor között, sem azok egyidejű bemutatása esetén30. Továbbá Cohn és mtsai. 41 nem mutatott hatást a csirke takarmányhoz adott 20%-os GLU, SUC, FRU és GAL hozzáadásának a megfelelő FA profilokra. Ezeket a spektrumokat inkább technikai, mint biológiai ismétlésekből nyerték, ami a szerzők magyarázata szerint korlátozhatja a statisztikai elemzést. Továbbá az izocukor-ellenőrzés hiánya (CEL használatával) korlátozza az eredmények értelmezését. A közelmúltban Nugroho RA et al. anomáliákat mutatott az FA spektrumban42,43. Az első vizsgálatban Nugroho RA et al. 43 tesztelte az FRU fermentált pálmamagliszthez való hozzáadásának hatását. Az így létrejött lárvák FA-profilja abnormálisan magas PUFA-szintet mutatott, amelynek több mint 90%-a a 10% FRU-t tartalmazó étrendből származott (hasonlóan a mi vizsgálatunkhoz). Bár ez a diéta PUFA-ban gazdag halpelletet is tartalmazott, a lárvák FA profilértékei a 100%-ban fermentált PCM-et tartalmazó kontrolltápon nem voltak összhangban a korábban közölt profillal, különösen a C18:3n3 kóros, 17,77-es szintjével. ± 1,67% és 26,08 ± 0,20% a konjugált linolsav esetében (C18:2n6t), a linolsav ritka izomerje. A második vizsgálat hasonló eredményeket mutatott, beleértve a FRU-t, a GLU-t, a MAL-t és a SUC42-t fermentált pálmamaglisztben. Ezek a tanulmányok, akárcsak a miénk, rávilágítanak a BSF lárvákkal végzett táplálkozási kísérletek eredményeinek összehasonlítására, mint például a kontrollok, a más tápanyagforrásokkal való kölcsönhatások és az FA-elemzési módszerek összehasonlítása.
A kísérletek során megfigyeltük, hogy a szubsztrátum színe és illata az alkalmazott étrendtől függően változott. Ez arra utal, hogy a mikroorganizmusok szerepet játszhatnak a szubsztrátumban és a lárvák emésztőrendszerében megfigyelt eredményekben. Valójában a monoszacharidok és diszacharidok könnyen metabolizálódnak a kolonizáló mikroorganizmusok által. Az oldható cukrok mikroorganizmusok általi gyors elfogyasztása nagy mennyiségű mikrobiális anyagcseretermék, például etanol, tejsav, rövid szénláncú zsírsavak (pl. ecetsav, propionsav, vajsav) és szén-dioxid felszabadulását eredményezheti44. Ezen vegyületek némelyike ​​felelős lehet a lárvákra gyakorolt ​​halálos toxikus hatásokért, amelyeket Cohn és munkatársai41 is megfigyeltek hasonló fejlődési körülmények között. Például az etanol káros a rovarokra45. A nagy mennyiségű szén-dioxid-kibocsátás a tartály alján felhalmozódását eredményezheti, ami oxigéntől megfoszthatja a légkört, ha a levegő keringése nem teszi lehetővé a kibocsátását. Ami az SCFA-kat illeti, a rovarokra, különösen a H. illucensre gyakorolt ​​hatásuk továbbra is kevéssé ismert, bár a tejsav, a propionsav és a vajsav halálosnak bizonyult a Callosobruchus maculatusban (Fabricius 1775)46. A Drosophila melanogaster Meigen 1830-ban ezek az SCFA-k szaglási markerek, amelyek a nőstényeket a peterakás helyére irányítják, ami arra utal, hogy jótékony szerepet játszanak a lárvafejlődésben47. Az ecetsav azonban veszélyes anyagként van besorolva, és jelentősen gátolja a lárvafejlődést47. Ezzel szemben a mikrobiális eredetű laktátról nemrégiben azt találták, hogy védő hatást fejt ki az invazív bélmikrobák ellen a Drosophila48-ban. Ezenkívül az emésztőrendszerben lévő mikroorganizmusok szerepet játszanak a rovarok CH-emésztésében is49. Az SCFA-knak a bél mikrobiotára gyakorolt ​​fiziológiai hatásait, például a táplálkozási sebességet és a génexpressziót gerinceseknél írták le 50 . Emellett trofikus hatást gyakorolhatnak a H. illucens lárvákra, és részben hozzájárulhatnak az FA-profilok szabályozásához. Az ezen mikrobiális fermentációs termékek táplálkozási hatásairól szóló tanulmányok tisztázni fogják a H. illucens táplálkozásra gyakorolt ​​hatásukat, és alapot adnak a jövőbeni tanulmányokhoz, amelyek hasznos vagy káros mikroorganizmusokat vizsgálnak fejlődésük és az FA-ban gazdag szubsztrátok értéke szempontjából. Ezzel kapcsolatban egyre inkább tanulmányozzák a mikroorganizmusok szerepét a tömegesen tenyésztett rovarok emésztési folyamataiban. A rovarokat kezdik bioreaktoroknak tekinteni, amelyek olyan pH- és oxigénellátási feltételeket biztosítanak, amelyek elősegítik a rovarok számára nehezen emészthető tápanyagok lebontására vagy méregtelenítésére specializálódott mikroorganizmusok fejlődését51. Nemrég Xiang és munkatársai52 kimutatták, hogy például a szerves hulladékok bakteriális keverékkel való beoltása lehetővé teszi a CF számára, hogy magához vonzza a lignocellulóz lebontására specializálódott baktériumokat, javítva a szubsztrátumban történő lebomlását a lárvák nélküli szubsztrátumokhoz képest.
Végezetül, ami a szerves hulladék H. illucens általi jótékony felhasználását illeti, a CEL és SUC étrendek termelték a legtöbb lárvát naponta. Ez azt jelenti, hogy az egyes egyedek kisebb végső tömege ellenére az emészthetetlen CH-t tartalmazó szubsztrátumon termelt lárva össztömege összemérhető a monoszacharidokat és diszacharidokat tartalmazó homoszacharid diétán elért tömeggel. Vizsgálatunk során fontos megjegyezni, hogy az egyéb tápanyagok szintje elegendő a lárvapopuláció növekedésének támogatásához, és a CEL hozzáadását korlátozni kell. A lárvák végső összetétele azonban eltérő, ami rávilágít a rovarok felértékelésére szolgáló megfelelő stratégia kiválasztásának fontosságára. A teljes takarmányozással etetett CEL lárvák alacsonyabb zsírtartalmuk és alacsonyabb laurinsavtartalmuk miatt inkább állati takarmányozásra alkalmasak, míg a SUC vagy MAL étrenddel táplált lárvák préseléses zsírtalanítást igényelnek az olaj értékének növelése érdekében, különösen a bioüzemanyagban. ágazat. A LAC megtalálható a tejipar melléktermékeiben, például a sajtgyártásból származó savóban. A közelmúltban a használata (3,5% laktóz) javította a lárva végső testtömegét53. Ebben a vizsgálatban azonban a kontroll étrend a lipidtartalom felét tartalmazta. Ezért a LAC táplálkozásellenes hatásait ellensúlyozhatta az étrendi lipidek lárvák bioakkumulációja.
Amint azt korábbi tanulmányok kimutatták, a monoszacharidok és diszacharidok tulajdonságai jelentősen befolyásolják a BSFL növekedését és módosítják FA profilját. Különösen úgy tűnik, hogy a LAC táplálkozásellenes szerepet játszik a lárvafejlődés során, mivel korlátozza a CH elérhetőségét az étrendi lipidek felszívódásához, ezáltal elősegítve az UFA bioakkumulációját. Ebben az összefüggésben érdekes lenne biológiai vizsgálatokat végezni PUFA és LAC kombinálásával. Továbbá a mikroorganizmusok, különösen a cukorfermentációs folyamatokból származó mikrobiális metabolitok (például SCFA-k) szerepe továbbra is vizsgálatra érdemes kutatási téma.
A rovarokat a Funkcionális és Evolúciós Rovartani Laboratórium 2017-ben alapított BSF kolóniájából szerezték be az Agro-Bio Tech-ben, Gembloux-ban, Belgiumban (a tenyésztési módszerekről bővebben lásd: Hoc et al. 19). Kísérleti vizsgálatokhoz naponta 2,0 g BSF tojást gyűjtöttünk véletlenszerűen a tenyészketrecekből, és 2,0 kg 70%-os nedves csirketakarmányban inkubáltuk (Aveve, Leuven, Belgium). Öt nappal a kikelés után a lárvákat elválasztottuk a szubsztráttól, és manuálisan megszámoltuk kísérleti célokra. Megmértük az egyes tételek kezdeti tömegét. Az átlagos egyéni súly 7, 125 ± 0, 41 mg volt, és az egyes kezelések átlaga az S2 kiegészítő táblázatban látható.
Az étrend-összetételt Barragan-Fonseca és munkatársai tanulmányából adaptálták. 38 . Röviden, kompromisszumot találtak a lárvacsirkék azonos takarmányminősége, hasonló szárazanyag (DM) tartalom, magas CH (10% friss étrend alapján) és állaga között, mivel az egyszerű cukroknak és diszacharidoknak nincs szerkezeti tulajdonságaik. A gyártó információi szerint (Chicken Feed, AVEVE, Leuven, Belgium) a vizsgált CH-t (azaz oldható cukrot) külön-külön adták hozzá autoklávozott vizes oldatként (15,9%) a 16,0% fehérjét, 5,0% összes lipidet tartalmazó étrendhez, 11,9% őrölt csirke takarmány, amely hamut és 4,8% rostot tartalmaz. Mindegyik 750 ml-es edényben (17,20 × 11,50 × 6,00 cm, AVA, Tempsee, Belgium) 101,9 g autoklávozott CH-oldatot kevertünk össze 37,8 g csirketakarmányral. A szárazanyag-tartalom minden étrend esetében 37,0% volt, beleértve a homogén fehérjét (11,7%), a homogén lipideket (3,7%) és a homogén cukrokat (a hozzáadott CH 26,9%-a). A vizsgált CH glükóz (GLU), fruktóz (FRU), galaktóz (GAL), maltóz (MAL), szacharóz (SUC) és laktóz (LAC) volt. A kontroll étrend cellulózból (CEL) állt, amely a H. illucens lárvák számára emészthetetlennek tekinthető38. Száz 5 napos lárvát helyeztünk egy tetővel ellátott tálcába, amelynek közepén 1 cm átmérőjű lyuk volt, és műanyag szúnyoghálóval lefedtük. Mindegyik diétát négyszer megismételték.
A lárvák tömegét három nappal a kísérlet megkezdése után mértük. Minden méréshez 20 lárvát távolítottunk el a szubsztrátról steril meleg vízzel és csipesszel, szárítottuk és lemértük (STX223, Ohaus Scout, Parsippany, USA). A mérés után a lárvákat visszahelyeztük a szubsztrát közepére. A méréseket hetente háromszor rendszeresen végezték az első prepupa megjelenéséig. Ezen a ponton gyűjtsük össze, számoljuk meg és mérjük le az összes lárvát a korábban leírtak szerint. Különítsd el a 6. stádiumú lárvákat (azaz a prepupal stádiumot megelőző lárvaállapotnak megfelelő fehér lárvákat) és a prepupae-okat (azaz az utolsó lárvaállapot, amely során a BSF lárvák elfeketednek, abbahagyják a táplálkozást, és metamorfózisra alkalmas környezetet keresnek), és 18°C az összetétel elemzéséhez. A hozamot az edényenként kapott rovarok (6. stádiumú lárvák és prebábok) össztömegének (g) és a fejlődési időnek (d) arányában számítottuk ki. A szövegben szereplő összes átlagértéket a következőképpen fejezzük ki: átlag ± SD.
Az összes ezt követő lépést oldószerekkel (hexán (Hex), kloroform (CHCl3), metanol (MeOH)) elszívófülke alatt végeztük, és nitril kesztyűt, kötényt és védőszemüveget kellett viselni.
A fehér lárvákat FreeZone6 fagyasztva szárítóban (Labconco Corp., Kansas City, MO, USA) 72 órán át szárítottuk, majd őröltük (IKA A10, Staufen, Németország). Az összes lipidet ±1 g porból a Folch-módszerrel 54 extraháltuk. Minden egyes liofilizált minta maradék nedvességtartalmát két párhuzamosban határoztuk meg nedvességelemzővel (MA 150, Sartorius, Göttiggen, Németország) az összes lipid korrigálása érdekében.
Az összes lipidet savas körülmények között átésztereztük, így zsírsav-metil-észtereket kaptunk. Röviden, körülbelül 10 mg lipid/100 µl CHCl3 oldatot (100 µl) nitrogénnel elpárologtatunk egy 8 ml-es Pyrex© csőben (SciLabware – DWK Life Sciences, London, Egyesült Királyság). A csövet hexán (0,5 ml) (PESTINORM® SUPRATRACE n-hexán > 95% szerves nyomelemzéshez, VWR Chemicals, Radnor, PA, USA) és Hex/MeOH/BF3 (20/25/55) oldatba (0,5) helyeztük. ml) 70 °C-os vízfürdőben 90 percig. Lehűlés után 10%-os vizes H2SO4-oldatot (0,2 ml) és telített NaCl-oldatot (0,5 ml) adunk hozzá. Keverje össze a csövet, és töltse fel a keveréket tiszta hexánnal (8,0 ml). A felső fázis egy részét fiolába vittük át, és gázkromatográfiával analizáltuk lángionizációs detektorral (GC-FID). A mintákat egy Trace GC Ultra (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) segítségével elemeztük osztott/osztatlan injektorral (240 °C) split módban (osztott áramlás: 10 ml/perc), Stabilwax®-DA oszlopot ( 30 m, 0,25 mm belső átmérő, 0,25 μm, Restek Corp., Bellefonte, PA, USA) és egy FID (250 °C). A hőmérsékleti programot a következőképpen állítottuk be: 50 °C 1 percig, 30 °C/perc sebességgel 150 °C-ra növelve, 4 °C/perc sebességgel 240 °C-ra emelve és 240 °C-on 5 percig folytatva. Vakmintaként Hexet használtunk, és 37 zsírsav-metil-észtert (Supelco 37-komponensű FAMEmix, Sigma-Aldrich, Overijse, Belgium) tartalmazó referencia standardot használtunk az azonosításhoz. A telítetlen zsírsavak (UFA-k) azonosítását átfogó kétdimenziós GC (GC×GC-FID) igazolta, az izomerek jelenlétét pedig Ferrara et al. módszerének enyhe adaptációjával határoztuk meg pontosan. 55. A műszer részletei az S3 kiegészítő táblázatban, az eredmények pedig az S5 kiegészítő ábrán találhatók.
Az adatok Excel táblázatos formátumban jelennek meg (Microsoft Corporation, Redmond, WA, USA). A statisztikai elemzést az R Studio (2023.12.1+402-es verzió, Boston, USA) 56 segítségével végeztük. A lárva tömegére, fejlődési idejére és termelékenységére vonatkozó adatokat a lineáris modell (LM) segítségével becsültük meg (parancs „lm”, R csomag „stats” 56 ), mivel illeszkednek a Gauss-eloszláshoz. A túlélési arányokat binomiális modellanalízissel az általános lineáris modell (GLM) segítségével becsülték meg (parancs „glm”, R csomag „lme4” 57 ). A normalitást és a homoszkedaszticitást a Shapiro teszt (parancs „shapiro.test”, R csomag „stats” 56) és az adatok varianciaanalízise (betadisper parancs, R csomag „vegan” 58 ) segítségével igazoltuk. Az LM vagy GLM tesztből származó szignifikáns p-értékek (p < 0,05) páronkénti elemzése után az EMM teszt segítségével szignifikáns különbségeket mutattunk ki a csoportok között (parancs „emmeans”, R csomag „emmeans” 59).
A teljes FA-spektrumokat többváltozós permutációs varianciaanalízissel (azaz permMANOVA; parancs „adonis2”, R csomag „vegan” 58) hasonlítottuk össze az euklideszi távolságmátrix és 999 permutáció segítségével. Ez segít azonosítani azokat a zsírsavakat, amelyeket a táplálékban lévő szénhidrátok természete befolyásol. Az FA profilok szignifikáns különbségeit páronkénti összehasonlítással tovább elemeztük. Az adatokat ezután főkomponens-analízis (PCA) segítségével vizualizáltuk ("PCA" parancs, R-csomag "FactoMineR" 60). Az ezekért a különbségekért felelős FA-t a korrelációs körök értelmezésével azonosítottuk. Ezeket a jelölteket egyutas varianciaanalízissel (ANOVA) erősítették meg (parancs „aov”, R csomag „stats” 56 ), majd Tukey post hoc tesztje (TukeyHSD parancs, R csomag „stats” 56 ). Az elemzés előtt a normalitást Shapiro-Wilk teszttel, a homoszkedaszticitást Bartlett-teszttel ellenőriztük (parancs „bartlett.test”, R csomag „stats” 56), és nem paraméteres módszert alkalmaztunk, ha a két feltevés egyike sem teljesült. . Az elemzéseket összehasonlítottuk (parancs „kruskal.test”, R csomag „stats” 56 ), majd Dunn post hoc tesztjeit alkalmaztuk (dunn.test parancs, R csomag „dunn.test” 56 ).
A kézirat végleges változatát a Grammarly Editor segítségével ellenőrizték angol lektorként (Grammarly Inc., San Francisco, California, USA) 61 .
A jelen tanulmány során generált és elemzett adatkészletek ésszerű kérésre elérhetők a megfelelő szerzőtől.
Kim, SW és mtsai. A takarmányfehérje iránti globális kereslet kielégítése: kihívások, lehetőségek és stratégiák. Annals of Animal Biosciences 7, 221–243 (2019).
Caparros Megido, R. és mtsai. Az ehető rovarok világtermelésének helyzetének és kilátásainak áttekintése. Entomol. Gen. 44, (2024).
Rehman, K. ur és mtsai. Fekete katonalégy (Hermetia illucens) mint potenciálisan innovatív és környezetbarát eszköz a szerves hulladék kezelésében: Rövid áttekintés. Hulladékgazdálkodási Kutatás 41, 81–97 (2023).
Skala, A. és mtsai. A felnevelési szubsztrát befolyásolja az iparilag előállított fekete katonalégylárvák növekedését és makrotápanyag-állapotát. Sci. Rep. 10, 19448 (2020).
Shu, MK és mtsai. Zsemlemorzsán nevelkedett fekete katonalégylárvák olajkivonatainak antimikrobiális tulajdonságai. Animal Food Science, 64, (2024).
Schmitt, E. és de Vries, W. (2020). A fekete katonalégytrágya talajjavítóként való felhasználásának lehetséges előnyei az élelmiszer-termeléshez és a környezeti hatások csökkentése. Jelenlegi vélemény. Green Sustain. 25, 100335 (2020).
Franco A. et al. Fekete katonalégy lipidek – innovatív és fenntartható forrás. Fenntartható Fejlődés, Vol. 13, (2021).
Van Huis, A. Rovarok mint élelmiszer és takarmány, a mezőgazdaság feltörekvő területe: áttekintés. J. Insect Feed 6, 27–44 (2020).
Kachor, M., Bulak, P., Prots-Petrikha, K., Kirichenko-Babko, M., and Beganovsky, A. A fekete katona repülésének különféle felhasználásai az iparban és a mezőgazdaságban – áttekintés. Biology 12, (2023).
Hock, B., Noel, G., Carpentier, J., Francis, F., and Caparros Megido, R. A Hermetia illucens mesterséges szaporításának optimalizálása. PLOS ONE 14, (2019).