Salamat sa pagbisita sa Nature.com. Ang bersyon ng browser na iyong ginagamit ay may limitadong suporta sa CSS. Para sa pinakamahusay na mga resulta, inirerekomenda namin ang paggamit ng isang mas bagong browser (o i-disable ang compatibility mode sa Internet Explorer). Pansamantala, upang matiyak ang patuloy na suporta, ipapakita namin ang site nang walang mga istilo at JavaScript.
Ang pagsasaka ng insekto ay isang potensyal na paraan upang matugunan ang lumalaking pandaigdigang pangangailangan para sa protina at ito ay isang bagong aktibidad sa Kanlurang mundo kung saan maraming tanong ang nananatili tungkol sa kalidad at kaligtasan ng produkto. Ang mga insekto ay maaaring gumanap ng isang mahalagang papel sa pabilog na ekonomiya sa pamamagitan ng pag-convert ng biowaste sa mahalagang biomass. Halos kalahati ng substrate ng feed para sa mga mealworm ay nagmumula sa wet feed. Ito ay maaaring makuha mula sa biowaste, na ginagawang mas sustainable ang pagsasaka ng insekto. Ang artikulong ito ay nag-uulat sa nutritional composition ng mealworms (Tenebrio molitor) na pinapakain ng mga organikong suplemento mula sa mga by-product. Kabilang dito ang mga hindi nabentang gulay, hiwa ng patatas, fermented chicory roots at mga dahon ng hardin. Ito ay tinasa sa pamamagitan ng pagsusuri sa proximate na komposisyon, fatty acid profile, mineral at mabibigat na metal na nilalaman. Ang mga mealworm na pinapakain ng mga hiwa ng patatas ay may dobleng nilalaman ng taba at pagtaas ng mga saturated at monounsaturated na fatty acid. Ang paggamit ng fermented chicory root ay nagpapataas ng mineral na nilalaman at nag-iipon ng mabibigat na metal. Bilang karagdagan, ang pagsipsip ng mga mineral ng mealworm ay pumipili, dahil ang mga konsentrasyon lamang ng calcium, iron at manganese ay nadagdagan. Ang pagdaragdag ng mga pinaghalong gulay o mga dahon ng hardin sa diyeta ay hindi makabuluhang magbabago sa nutritional profile. Sa konklusyon, ang by-product stream ay matagumpay na na-convert sa isang biomass na mayaman sa protina, ang nutrient content at bioavailability na nakaimpluwensya sa komposisyon ng mealworms.
Ang lumalaking populasyon ng tao ay inaasahang aabot sa 9.7 bilyon pagsapit ng 20501,2 na naglalagay ng presyon sa ating produksyon ng pagkain upang makayanan ang mataas na pangangailangan para sa pagkain. Tinatayang tataas ang demand ng pagkain ng 70-80% sa pagitan ng 2012 at 20503,4,5. Ang mga likas na yaman na ginagamit sa kasalukuyang produksyon ng pagkain ay nauubos, na nagbabanta sa ating ecosystem at mga suplay ng pagkain. Bilang karagdagan, ang malaking halaga ng biomass ay nasasayang na nauugnay sa paggawa at pagkonsumo ng pagkain. Tinatayang sa 2050, ang taunang dami ng basura sa mundo ay aabot sa 27 bilyong tonelada, karamihan sa mga ito ay bio-waste6,7,8. Bilang tugon sa mga hamong ito, ang mga makabagong solusyon, mga alternatibong pagkain at napapanatiling pag-unlad ng agrikultura at mga sistema ng pagkain ay iminungkahi9,10,11. Ang isa sa gayong paraan ay ang paggamit ng mga organikong nalalabi upang makagawa ng mga hilaw na materyales tulad ng mga nakakain na insekto bilang napapanatiling mapagkukunan ng pagkain at feed12,13. Ang pagsasaka ng insekto ay gumagawa ng mas mababang greenhouse gas at ammonia emissions, nangangailangan ng mas kaunting tubig kaysa sa tradisyonal na pinagmumulan ng protina, at maaaring gawin sa mga vertical farming system, na nangangailangan ng mas kaunting espasyo14,15,16,17,18,19. Ipinakita ng mga pag-aaral na nagagawa ng mga insekto na i-convert ang mababang halaga ng biowaste sa mahalagang biomass na mayaman sa protina na may mga nilalamang tuyong bagay na hanggang 70%20,21,22. Higit pa rito, ang mababang halaga ng biomass ay kasalukuyang ginagamit para sa produksyon ng enerhiya, landfill o recycling at samakatuwid ay hindi nakikipagkumpitensya sa kasalukuyang sektor ng pagkain at feed23,24,25,26. Ang mealworm (T. molitor)27 ay itinuturing na isa sa mga pinaka-promising na species para sa malakihang produksyon ng pagkain at feed. Ang parehong larvae at matatanda ay kumakain ng iba't ibang materyal tulad ng mga produktong butil, dumi ng hayop, gulay, prutas, atbp. 28,29. Sa mga lipunang Kanluranin, ang T. molitor ay pinalaki sa pagkabihag sa isang maliit na antas, pangunahin bilang feed para sa mga alagang hayop tulad ng mga ibon o reptilya. Sa kasalukuyan, ang kanilang potensyal sa produksyon ng pagkain at feed ay tumatanggap ng higit na atensyon30,31,32. Halimbawa, ang T. molitor ay inaprubahan ng isang bagong profile ng pagkain, kabilang ang paggamit sa frozen, tuyo at powdered forms (Regulation (EU) No 258/97 at Regulation (EU) 2015/2283) 33. Gayunpaman, malakihang produksyon ng mga insekto para sa pagkain at feed ay medyo bagong konsepto pa rin sa mga bansa sa Kanluran. Ang industriya ay nahaharap sa mga hamon tulad ng mga agwat sa kaalaman tungkol sa mga pinakamainam na diyeta at produksyon, kalidad ng nutrisyon ng panghuling produkto, at mga isyu sa kaligtasan tulad ng nakakalason na build-up at mga panganib sa microbial. Hindi tulad ng tradisyonal na pagsasaka ng mga hayop, ang pagsasaka ng insekto ay walang katulad na makasaysayang track record17,24,25,34.
Bagaman maraming pag-aaral ang isinagawa sa nutritional value ng mealworms, ang mga salik na nakakaapekto sa nutritional value ng mga ito ay hindi pa lubos na nauunawaan. Ipinakita ng mga nakaraang pag-aaral na ang pagkain ng mga insekto ay maaaring magkaroon ng ilang epekto sa komposisyon nito, ngunit walang nakitang malinaw na pattern. Bilang karagdagan, ang mga pag-aaral na ito ay nakatuon sa mga bahagi ng protina at lipid ng mga mealworm, ngunit may limitadong epekto sa mga sangkap ng mineral21,22,32,35,36,37,38,39,40. Higit pang pananaliksik ang kailangan upang maunawaan ang kapasidad ng pagsipsip ng mineral. Napagpasyahan ng isang kamakailang pag-aaral na ang mealworm larvae na pinapakain ng labanos ay may bahagyang mataas na konsentrasyon ng ilang mga mineral. Gayunpaman, ang mga resultang ito ay limitado sa nasubok na substrate, at kailangan ang karagdagang mga pagsubok sa industriya41. Ang akumulasyon ng mabibigat na metal (Cd, Pb, Ni, As, Hg) sa mga mealworm ay naiulat na makabuluhang nauugnay sa nilalaman ng metal ng matrix. Bagama't ang mga konsentrasyon ng mga metal na matatagpuan sa pagkain sa feed ng hayop ay mas mababa sa mga legal na limitasyon42, ang arsenic ay natagpuan din na bioaccumulate sa mealworm larvae, samantalang ang cadmium at lead ay hindi bioaccumulate43. Ang pag-unawa sa mga epekto ng diyeta sa nutritional composition ng mealworms ay kritikal sa kanilang ligtas na paggamit sa pagkain at feed.
Ang pag-aaral na ipinakita sa papel na ito ay nakatuon sa epekto ng paggamit ng mga produktong pang-agrikultura bilang wet feed source sa nutritional composition ng mealworms. Bilang karagdagan sa tuyong feed, dapat ding ibigay ang wet feed sa larvae. Ang wet feed source ay nagbibigay ng kinakailangang moisture at nagsisilbi rin bilang nutritional supplement para sa mealworms, pagtaas ng growth rate at maximum body weight44,45. Ayon sa aming karaniwang data ng pag-aalaga ng mealworm sa proyekto ng Interreg-Valusect, ang kabuuang feed ng mealworm ay naglalaman ng 57% w/w wet feed. Karaniwan, ang mga sariwang gulay (hal. carrots) ay ginagamit bilang wet feed source35,36,42,44,46. Ang paggamit ng mababang halaga ng mga by-product bilang wet feed source ay magdadala ng mas napapanatiling at pang-ekonomiyang benepisyo sa pagsasaka ng insekto17. Ang layunin ng pag-aaral na ito ay (1) imbestigahan ang mga epekto ng paggamit ng biowaste bilang wet feed sa nutritional composition ng mealworms, (2) matukoy ang macro- at micronutrient na nilalaman ng mealworm larvae na pinalaki sa mineral-rich biowaste upang masubukan ang pagiging posible ng mineral fortification, at (3) suriin ang kaligtasan ng mga by-product na ito sa pagsasaka ng insekto sa pamamagitan ng pagsusuri sa presensya at akumulasyon ng mabibigat na metal na Pb, Cd at Cr. Ang pag-aaral na ito ay magbibigay ng karagdagang impormasyon sa mga epekto ng biowaste supplementation sa mealworm larval diets, nutritional value at kaligtasan.
Ang nilalaman ng dry matter sa lateral flow ay mas mataas kumpara sa control wet nutrient agar. Ang nilalaman ng dry matter sa mga pinaghalong gulay at mga dahon ng hardin ay mas mababa sa 10%, samantalang ito ay mas mataas sa mga pinagputulan ng patatas at fermented chicory roots (13.4 at 29.9 g/100 g fresh matter, FM).
Ang pinaghalong gulay ay may mas mataas na krudo na abo, taba at nilalaman ng protina at mas mababang nilalamang non-fibrous na carbohydrate kaysa sa control feed (agar), habang ang amylase-treated neutral detergent fiber content ay magkatulad. Ang nilalaman ng carbohydrate ng mga hiwa ng patatas ay ang pinakamataas sa lahat ng mga side stream at maihahambing sa agar. Sa pangkalahatan, ang krudo na komposisyon nito ay halos kapareho sa control feed, ngunit dinagdagan ng maliit na halaga ng protina (4.9%) at krudo na abo (2.9%) 47,48 . Ang pH ng patatas ay mula 5 hanggang 6, at ito ay nagkakahalaga ng noting na ito patatas side stream ay mas acidic (4.7). Ang fermented chicory root ay mayaman sa abo at ito ang pinaka acidic sa lahat ng side stream. Dahil ang mga ugat ay hindi nalinis, karamihan sa abo ay inaasahang binubuo ng buhangin (silica). Ang mga dahon ng hardin ay ang tanging alkaline na produkto kumpara sa control at iba pang mga side stream. Naglalaman ito ng mataas na antas ng abo at protina at mas mababang carbohydrates kaysa sa kontrol. Ang krudo na komposisyon ay pinakamalapit sa fermented chicory root, ngunit ang krudo na konsentrasyon ng protina ay mas mataas (15.0%), na maihahambing sa protina na nilalaman ng pinaghalong gulay. Ang pagtatasa ng istatistika ng data sa itaas ay nagpakita ng mga makabuluhang pagkakaiba sa komposisyon ng krudo at pH ng mga side stream.
Ang pagdaragdag ng mga pinaghalong gulay o mga dahon ng hardin sa mealworm feed ay hindi nakaapekto sa biomass na komposisyon ng mealworm larvae kumpara sa control group (Talahanayan 1). Ang pagdaragdag ng mga pinagputulan ng patatas ay nagresulta sa pinaka makabuluhang pagkakaiba sa komposisyon ng biomass kumpara sa control group na tumatanggap ng mealworm larvae at iba pang pinagkukunan ng wet feed. Tulad ng para sa nilalaman ng protina ng mga mealworm, maliban sa mga pinagputulan ng patatas, ang iba't ibang tinatayang komposisyon ng mga side stream ay hindi nakakaapekto sa nilalaman ng protina ng larvae. Ang pagpapakain ng mga pinagputulan ng patatas bilang pinagmumulan ng kahalumigmigan ay humantong sa dalawang beses na pagtaas sa taba ng nilalaman ng larvae at pagbaba sa nilalaman ng protina, chitin, at hindi fibrous na carbohydrates. Ang fermented chicory root ay nagpapataas ng abo na nilalaman ng mealworm larvae ng isa at kalahating beses.
Ang mga profile ng mineral ay ipinahayag bilang mga nilalaman ng macromineral (Talahanayan 2) at micronutrient (Talahanayan 3) sa wet feed at mealworm larval biomass.
Sa pangkalahatan, ang mga sidestream ng agrikultura ay mas mayaman sa mga macromineral kumpara sa control group, maliban sa mga pinagputulan ng patatas, na may mas mababang nilalaman ng Mg, Na at Ca. Ang konsentrasyon ng potasa ay mataas sa lahat ng mga sidestream kumpara sa kontrol. Ang Agar ay naglalaman ng 3 mg/100 g DM K, habang ang K na konsentrasyon sa sidestream ay mula 1070 hanggang 9909 mg/100 g DM. Ang macromineral content sa pinaghalong gulay ay makabuluhang mas mataas kaysa sa control group, ngunit ang Na content ay makabuluhang mas mababa (88 vs. 111 mg/100 g DM). Ang macromineral na konsentrasyon sa mga pinagputulan ng patatas ay ang pinakamababa sa lahat ng sidestreams. Ang macromineral na nilalaman sa mga pinagputulan ng patatas ay makabuluhang mas mababa kaysa sa iba pang mga sidestream at kontrol. Maliban na ang nilalaman ng Mg ay maihahambing sa control group. Kahit na ang fermented chicory root ay walang pinakamataas na konsentrasyon ng macrominerals, ang ash content ng side stream na ito ang pinakamataas sa lahat ng side stream. Ito ay maaaring dahil sa ang katunayan na ang mga ito ay hindi nalinis at maaaring naglalaman ng mataas na konsentrasyon ng silica (buhangin). Ang mga nilalaman ng Na at Ca ay maihahambing sa mga nilalaman ng pinaghalong gulay. Ang fermented chicory root ay naglalaman ng pinakamataas na konsentrasyon ng Na sa lahat ng side stream. Maliban sa Na, ang mga dahon ng hortikultural ay may pinakamataas na konsentrasyon ng mga macromineral sa lahat ng mga basang pagkain. Ang konsentrasyon ng K (9909 mg/100 g DM) ay tatlong libong beses na mas mataas kaysa sa kontrol (3 mg/100 g DM) at 2.5 beses na mas mataas kaysa sa pinaghalong gulay (4057 mg/100 g DM). Ang nilalaman ng Ca ay ang pinakamataas sa lahat ng mga side stream (7276 mg/100 g DM), 20 beses na mas mataas kaysa sa kontrol (336 mg/100 g DM) at 14 beses na mas mataas kaysa sa konsentrasyon ng Ca sa fermented chicory roots o vegetable mixture (530). at 496 mg/100 g DM).
Kahit na may mga makabuluhang pagkakaiba sa komposisyon ng macromineral ng mga diyeta (Talahanayan 2), walang nakitang makabuluhang pagkakaiba sa komposisyon ng macromineral ng mga mealworm na pinalaki sa mga pinaghalong gulay at mga control diet.
Ang mga larvae na pinapakain ng mga mumo ng patatas ay may makabuluhang mas mababang konsentrasyon ng lahat ng mga macromineral kumpara sa kontrol, maliban sa Na, na may maihahambing na mga konsentrasyon. Bilang karagdagan, ang pagpapakain ng malutong ng patatas ay nagdulot ng pinakamalaking pagbawas sa nilalaman ng larval macromineral kumpara sa iba pang mga sidestream. Ito ay pare-pareho sa mas mababang abo na naobserbahan sa mga kalapit na formulations ng mealworm. Gayunpaman, kahit na ang P at K ay makabuluhang mas mataas sa wet diet na ito kaysa sa iba pang mga sidestream at ang kontrol, ang komposisyon ng larval ay hindi sumasalamin dito. Ang mababang konsentrasyon ng Ca at Mg na matatagpuan sa biomass ng mealworm ay maaaring nauugnay sa mababang konsentrasyon ng Ca at Mg na nasa wet diet mismo.
Ang pagpapakain ng fermented chicory roots at orchard dahon ay nagresulta sa mas mataas na antas ng calcium kaysa sa mga kontrol. Ang mga dahon ng halamanan ay naglalaman ng pinakamataas na antas ng P, Mg, K at Ca sa lahat ng mga wet diet, ngunit hindi ito nakita sa mealworm biomass. Ang mga konsentrasyon ng Na ay pinakamababa sa mga larvae na ito, habang ang mga konsentrasyon ng Na ay mas mataas sa mga dahon ng halamanan kaysa sa mga pinagputulan ng patatas. Ang nilalaman ng Ca ay tumaas sa larvae (66 mg/100 g DM), ngunit ang mga konsentrasyon ng Ca ay hindi kasing taas ng nasa mealworm biomass (79 mg/100 g DM) sa mga fermented chicory root trials, bagaman ang konsentrasyon ng Ca sa mga pananim ng dahon ng halamanan ay 14 beses na mas mataas kaysa sa chicory root.
Batay sa komposisyon ng microelement ng mga wet feed (Talahanayan 3), ang komposisyon ng mineral ng pinaghalong gulay ay katulad ng control group, maliban na ang konsentrasyon ng Mn ay makabuluhang mas mababa. Ang mga konsentrasyon ng lahat ng nasuri na microelement ay mas mababa sa mga hiwa ng patatas kumpara sa kontrol at iba pang mga by-product. Ang fermented chicory root ay naglalaman ng halos 100 beses na mas iron, 4 na beses na mas tanso, 2 beses na mas zinc at halos parehong dami ng mangganeso. Ang nilalaman ng zinc at manganese sa mga dahon ng mga pananim sa hardin ay makabuluhang mas mataas kaysa sa control group.
Walang nakitang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mga trace element na nilalaman ng larvae na pinapakain ng control, pinaghalong gulay, at mga wet potato scraps diets. Gayunpaman, ang mga nilalaman ng Fe at Mn ng larvae na nagpapakain ng fermented chicory root diet ay makabuluhang naiiba mula sa mga mealworm na pinakain sa control group. Ang pagtaas sa nilalaman ng Fe ay maaaring dahil sa isandaang beses na pagtaas sa konsentrasyon ng trace element sa wet diet mismo. Gayunpaman, kahit na walang makabuluhang pagkakaiba sa mga konsentrasyon ng Mn sa pagitan ng mga fermented chicory roots at ang control group, ang mga antas ng Mn ay tumaas sa larvae na pinakain ang fermented chicory roots. Dapat ding tandaan na ang konsentrasyon ng Mn ay mas mataas (3-tiklop) sa wet leaf diet ng horticulture diet kumpara sa control, ngunit walang makabuluhang pagkakaiba sa biomass composition ng mealworms. Ang tanging pagkakaiba sa pagitan ng kontrol at mga dahon ng hortikultura ay ang nilalaman ng Cu, na mas mababa sa mga dahon.
Ipinapakita sa talahanayan 4 ang mga konsentrasyon ng mabibigat na metal na matatagpuan sa mga substrate. Ang pinakamataas na konsentrasyon ng European ng Pb, Cd at Cr sa kumpletong mga feed ng hayop ay na-convert sa mg/100 g dry matter at idinagdag sa Talahanayan 4 upang mapadali ang paghahambing sa mga konsentrasyon na matatagpuan sa mga side stream47.
Walang Pb ang nakita sa control wet feeds, vegetable mixtures o potato brans, habang ang mga dahon ng hardin ay naglalaman ng 0.002 mg Pb/100 g DM at ang fermented chicory roots ay naglalaman ng pinakamataas na konsentrasyon ng 0.041 mg Pb/100 g DM. Ang mga konsentrasyon ng C sa mga control feed at mga dahon ng hardin ay maihahambing (0.023 at 0.021 mg/100 g DM), habang mas mababa ang mga ito sa mga pinaghalong gulay at patatas na brans (0.004 at 0.007 mg/100 g DM). Kung ikukumpara sa iba pang mga substrate, ang konsentrasyon ng Cr sa mga fermented chicory roots ay makabuluhang mas mataas (0.135 mg/100 g DM) at anim na beses na mas mataas kaysa sa control feed. Ang Cd ay hindi nakita sa alinman sa control stream o alinman sa mga side stream na ginamit.
Ang makabuluhang mas mataas na antas ng Pb at Cr ay natagpuan sa larvae na pinapakain ng fermented chicory roots. Gayunpaman, hindi nakita ang Cd sa anumang larvae ng mealworm.
Ang isang husay na pagsusuri ng mga fatty acid sa crude fat ay isinagawa upang matukoy kung ang fatty acid profile ng mealworm larvae ay maaaring maimpluwensyahan ng iba't ibang bahagi ng lateral stream kung saan sila pinakain. Ang pamamahagi ng mga fatty acid na ito ay ipinapakita sa Talahanayan 5. Ang mga fatty acid ay nakalista ayon sa kanilang karaniwang pangalan at molekular na istraktura (itinalaga bilang "Cx:y", kung saan ang x ay tumutugma sa bilang ng mga carbon atom at y sa bilang ng mga unsaturated bond ).
Ang profile ng fatty acid ng mga mealworm na pinapakain ng mga hiwa ng patatas ay makabuluhang nabago. Naglalaman ang mga ito ng mas mataas na dami ng myristic acid (C14:0), palmitic acid (C16:0), palmitoleic acid (C16:1), at oleic acid (C18:1). Ang mga konsentrasyon ng pentadecanoic acid (C15:0), linoleic acid (C18:2), at linolenic acid (C18:3) ay makabuluhang mas mababa kumpara sa iba pang mealworm. Kung ikukumpara sa ibang mga profile ng fatty acid, ang ratio ng C18:1 hanggang C18:2 ay binaligtad sa mga hiwa ng patatas. Ang mga mealworm na pinapakain ng mga dahon ng hortikultural ay naglalaman ng mas mataas na halaga ng pentadecanoic acid (C15:0) kaysa sa mga mealworm na pinapakain ng iba pang mga wet diet.
Ang mga fatty acid ay nahahati sa mga saturated fatty acid (SFA), monounsaturated fatty acid (MUFA), at polyunsaturated fatty acids (PUFA). Ipinapakita sa talahanayan 5 ang mga konsentrasyon ng mga pangkat ng fatty acid na ito. Sa pangkalahatan, ang mga profile ng fatty acid ng mga mealworm na pinapakain ng basura ng patatas ay makabuluhang naiiba sa kontrol at iba pang mga side stream. Para sa bawat grupo ng fatty acid, ang mga mealworm na pinapakain ng potato chips ay makabuluhang naiiba sa lahat ng iba pang mga grupo. Naglalaman sila ng mas maraming SFA at MUFA at mas kaunting PUFA.
Walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng survival rate at kabuuang bigat ng ani ng larvae na pinalaki sa iba't ibang substrate. Ang pangkalahatang average na rate ng kaligtasan ay 90%, at ang kabuuang average na timbang ng ani ay 974 gramo. Matagumpay na pinoproseso ng mga mealworm ang mga by-product bilang pinagmumulan ng wet feed. Ang mealworm wet feed ay nagkakahalaga ng higit sa kalahati ng kabuuang timbang ng feed (tuyo + basa). Ang pagpapalit ng mga sariwang gulay ng mga produktong pang-agrikultura bilang tradisyunal na wet feed ay may mga benepisyo sa ekonomiya at kapaligiran para sa pagsasaka ng mealworm.
Ipinapakita ng talahanayan 1 na ang biomass na komposisyon ng mealworm larvae na pinalaki sa control diet ay humigit-kumulang 72% moisture, 5% ash, 19% lipid, 51% protein, 8% chitin, at 18% dry matter bilang non-fibrous carbohydrates. Ito ay maihahambing sa mga halagang iniulat sa panitikan.48,49 Gayunpaman, ang iba pang mga bahagi ay matatagpuan sa panitikan, kadalasang nakadepende sa ginamit na pamamaraan ng pagsusuri. Halimbawa, ginamit namin ang pamamaraang Kjeldahl upang matukoy ang nilalaman ng krudo na protina na may ratio na N hanggang P na 5.33, samantalang ginagamit ng ibang mga mananaliksik ang mas malawak na ginagamit na ratio na 6.25 para sa mga sample ng karne at feed.50,51
Ang pagdaragdag ng mga scrap ng patatas (isang basang diyeta na mayaman sa karbohidrat) sa diyeta ay nagresulta sa pagdodoble ng taba ng nilalaman ng mga mealworm. Ang karbohidrat na nilalaman ng patatas ay inaasahang binubuo pangunahin ng almirol, samantalang ang agar ay naglalaman ng mga asukal (polysaccharides)47,48. Ang paghahanap na ito ay kabaligtaran sa isa pang pag-aaral na natagpuan na ang taba ng nilalaman ay bumaba kapag ang mga mealworm ay pinakain ng diyeta na dinagdagan ng steam-peeled na patatas na mababa sa protina (10.7%) at mataas sa starch (49.8%)36. Kapag ang olive pomace ay idinagdag sa diyeta, ang protina at carbohydrate na nilalaman ng mealworm ay tumugma sa wet diet, habang ang taba na nilalaman ay nanatiling hindi nagbabago35. Sa kabaligtaran, ipinakita ng iba pang mga pag-aaral na ang nilalaman ng protina ng larvae na pinalaki sa mga side stream ay sumasailalim sa mga pangunahing pagbabago, gayundin ang nilalaman ng taba22,37.
Ang fermented chicory root ay makabuluhang nadagdagan ang nilalaman ng abo ng mealworm larvae (Talahanayan 1). Ang pananaliksik sa mga epekto ng mga byproduct sa komposisyon ng abo at mineral ng mealworm larvae ay limitado. Karamihan sa mga byproduct feeding studies ay nakatuon sa taba at protina na nilalaman ng larvae nang hindi sinusuri ang nilalaman ng abo21,35,36,38,39. Gayunpaman, kapag ang nilalaman ng abo ng mga larvae na pinapakain ng mga byproduct ay nasuri, isang pagtaas sa nilalaman ng abo ay natagpuan. Halimbawa, ang pagpapakain ng mga mealworm na basura sa hardin ay nagtaas ng kanilang nilalamang abo mula 3.01% hanggang 5.30%, at ang pagdaragdag ng mga basurang pakwan sa diyeta ay nagpataas ng nilalaman ng abo mula 1.87% hanggang 4.40%.
Bagaman ang lahat ng mga mapagkukunan ng basang pagkain ay makabuluhang nag-iba sa kanilang tinatayang komposisyon (Talahanayan 1), ang mga pagkakaiba sa komposisyon ng biomass ng mealworm larvae na pinakain sa kani-kanilang mga mapagkukunan ng basang pagkain ay menor de edad. Tanging larvae ng mealworm na pinakain ng mga tipak ng patatas o fermented chicory root ang nagpakita ng makabuluhang pagbabago. Ang isang posibleng paliwanag para sa resultang ito ay na bilang karagdagan sa mga ugat ng chicory, ang mga tipak ng patatas ay bahagyang na-ferment din (pH 4.7, Talahanayan 1), na ginagawang mas madaling natutunaw/magagamit ang starch/carbohydrates sa larvae ng mealworm. Kung paano nagsi-synthesize ng mga lipid ang larvae ng mealworm mula sa mga sustansya gaya ng carbohydrates at dapat na ganap na tuklasin sa mga pag-aaral sa hinaharap. Ang isang nakaraang pag-aaral sa epekto ng wet diet pH sa mealworm larval growth ay nagpasiya na walang makabuluhang pagkakaiba ang naobserbahan kapag gumagamit ng agar blocks na may wet diets sa hanay ng pH na 3 hanggang 9. Ito ay nagpapahiwatig na ang fermented wet diets ay maaaring gamitin sa kultura ng Tenebrio molitor53 . Katulad ng Coudron et al.53, ang mga control experiment ay gumamit ng agar blocks sa mga wet diet na ibinigay dahil kulang ang mga ito sa mineral at nutrients. Hindi sinuri ng kanilang pag-aaral ang epekto ng mas maraming nutritionally diverse wet diet sources tulad ng mga gulay o patatas sa pagpapabuti ng digestibility o bioavailability. Ang mga karagdagang pag-aaral sa mga epekto ng pagbuburo ng mga pinagmumulan ng wet diet sa larvae ng mealworm ay kinakailangan upang higit pang tuklasin ang teoryang ito.
Ang pamamahagi ng mineral ng control mealworm biomass na natagpuan sa pag-aaral na ito (Tables 2 at 3) ay maihahambing sa hanay ng macro- at micronutrients na matatagpuan sa literatura48,54,55. Ang pagbibigay ng mga mealworm na may fermented chicory root bilang isang wet diet source ay nagpapalaki sa kanilang mineral na nilalaman. Bagama't ang karamihan sa mga macro- at micronutrients ay mas mataas sa mga pinaghalong gulay at mga dahon ng hardin (Talahanayan 2 at 3), hindi nila naapektuhan ang mineral na nilalaman ng biomass ng mealworm sa parehong lawak ng mga fermented chicory roots. Ang isang posibleng paliwanag ay ang mga sustansya sa mga dahon ng alkaline na hardin ay hindi gaanong bioavailable kaysa sa iba, mas acidic wet diets (Talahanayan 1). Ang mga nakaraang pag-aaral ay nagpakain ng mealworm larvae na may fermented rice straw at nalaman na sila ay nabuo nang maayos sa sidestream na ito at ipinakita rin na ang pre-treatment ng substrate sa pamamagitan ng fermentation ay nag-udyok ng nutrient uptake. 56 Ang paggamit ng fermented chicory roots ay nagpapataas ng Ca, Fe at Mn na nilalaman ng mealworm biomass. Bagaman ang sidestream na ito ay naglalaman din ng mas mataas na konsentrasyon ng iba pang mga mineral (P, Mg, K, Na, Zn at Cu), ang mga mineral na ito ay hindi gaanong mas sagana sa mealworm biomass kumpara sa control, na nagpapahiwatig ng selectivity ng mineral uptake. Ang pagtaas ng nilalaman ng mga mineral na ito sa mealworm biomass ay may nutritional value para sa mga layunin ng pagkain at feed. Ang calcium ay isang mahalagang mineral na gumaganap ng mahalagang papel sa neuromuscular function at maraming enzyme-mediated na proseso tulad ng pamumuo ng dugo, pagbuo ng buto at ngipin. 57,58 Ang kakulangan sa iron ay isang pangkaraniwang problema sa mga umuunlad na bansa, na ang mga bata, kababaihan, at matatanda ay madalas na hindi nakakakuha ng sapat na bakal mula sa kanilang mga diyeta. 54 Bagama't ang manganese ay isang mahalagang elemento sa pagkain ng tao at gumaganap ng isang pangunahing papel sa paggana ng maraming enzyme, ang labis na paggamit ay maaaring nakakalason. Ang mas mataas na antas ng manganese sa mga mealworm na pinapakain ng fermented chicory root ay hindi nababahala at maihahambing sa mga nasa manok. 59
Ang mga konsentrasyon ng mabibigat na metal na matatagpuan sa sidestream ay mas mababa sa European standards para sa kumpletong feed ng hayop. Ang mabibigat na pagsusuri ng metal ng mealworm larvae ay nagpakita na ang mga antas ng Pb at Cr ay makabuluhang mas mataas sa mga mealworm na pinapakain ng fermented chicory root kaysa sa control group at iba pang mga substrate (Talahanayan 4). Ang mga ugat ng chicory ay lumalaki sa lupa at kilala na sumisipsip ng mabibigat na metal, habang ang iba pang mga sidestream ay nagmumula sa kontroladong produksyon ng pagkain ng tao. Ang mga mealworm na pinapakain ng fermented chicory root ay naglalaman din ng mas mataas na antas ng Pb at Cr (Talahanayan 4). Ang kalkuladong bioaccumulation factor (BAF) ay 2.66 para sa Pb at 1.14 para sa Cr, ibig sabihin, higit sa 1, na nagpapahiwatig na ang mga mealworm ay may kakayahang mag-ipon ng mabibigat na metal. Tungkol sa Pb, ang EU ay nagtatakda ng pinakamataas na nilalaman ng Pb na 0.10 mg bawat kilo ng sariwang karne para sa pagkonsumo ng tao61. Sa aming pang-eksperimentong pagsusuri ng data, ang pinakamataas na konsentrasyon ng Pb na nakita sa fermented chicory root mealworms ay 0.11 mg/100 g DM. Kapag na-convert ang value sa isang dry matter content na 30.8% para sa mga mealworm na ito, ang Pb content ay 0.034 mg/kg fresh matter, na mas mababa sa maximum level na 0.10 mg/kg. Walang maximum na nilalaman ng Cr ang tinukoy sa mga regulasyon sa pagkain sa Europa. Ang Cr ay karaniwang matatagpuan sa kapaligiran, mga pagkain at mga additives ng pagkain at kilala bilang isang mahalagang nutrient para sa mga tao sa maliit na halaga62,63,64. Ang mga pagsusuring ito (Talahanayan 4) ay nagpapahiwatig na ang T. molitor larvae ay maaaring makaipon ng mabibigat na metal kapag ang mga mabibigat na metal ay naroroon sa pagkain. Gayunpaman, ang mga antas ng mabibigat na metal na matatagpuan sa mealworm biomass sa pag-aaral na ito ay itinuturing na ligtas para sa pagkonsumo ng tao. Inirerekomenda ang regular at maingat na pagsubaybay kapag gumagamit ng mga side stream na maaaring naglalaman ng mabibigat na metal bilang wet feed source para sa T. molitor.
Ang pinakamaraming fatty acid sa kabuuang biomass ng T. molitor larvae ay palmitic acid (C16:0), oleic acid (C18:1), at linoleic acid (C18:2) (Talahanayan 5), na naaayon sa mga nakaraang pag-aaral. sa T. molitor. Ang mga resulta ng fatty acid spectrum ay pare-pareho36,46,50,65. Ang fatty acid profile ng T. molitor sa pangkalahatan ay binubuo ng limang pangunahing bahagi: oleic acid (C18:1), palmitic acid (C16:0), linoleic acid (C18:2), myristic acid (C14:0), at stearic acid (C18:0). Ang oleic acid ay iniulat na ang pinaka-masaganang fatty acid (30-60%) sa mealworm larvae, na sinusundan ng palmitic acid at linoleic acid22,35,38,39. Ipinakita ng mga nakaraang pag-aaral na ang profile ng fatty acid na ito ay naiimpluwensyahan ng mealworm larval diet, ngunit ang mga pagkakaiba ay hindi sumusunod sa parehong mga uso tulad ng diet38. Kung ikukumpara sa iba pang mga profile ng fatty acid, ang ratio ng C18:1–C18:2 sa pagbabalat ng patatas ay binaligtad. Ang mga katulad na resulta ay nakuha para sa mga pagbabago sa fatty acid profile ng mga mealworm na pinakain ng steamed potato peelings36. Ang mga resultang ito ay nagpapahiwatig na kahit na ang fatty acid profile ng mealworm oil ay maaaring mabago, nananatili pa rin itong isang mayamang mapagkukunan ng unsaturated fatty acids.
Ang layunin ng pag-aaral na ito ay suriin ang epekto ng paggamit ng apat na magkakaibang agro-industrial biowaste stream bilang wet feed sa komposisyon ng mealworms. Ang epekto ay tinasa batay sa nutritional value ng larvae. Ang mga resulta ay nagpakita na ang mga by-product ay matagumpay na na-convert sa protina-rich biomass (protein content 40.7-52.3%), na maaaring magamit bilang pinagmumulan ng pagkain at feed. Bilang karagdagan, ipinakita ng pag-aaral na ang paggamit ng mga by-product bilang wet feed ay nakakaapekto sa nutritional value ng mealworm biomass. Sa partikular, ang pagbibigay ng larvae ng mataas na konsentrasyon ng carbohydrates (hal. patatas na hiwa) ay nagpapataas ng taba ng nilalaman nito at nagbabago sa komposisyon ng fatty acid: mas mababang nilalaman ng polyunsaturated fatty acid at mas mataas na nilalaman ng saturated at monounsaturated fatty acid, ngunit hindi sa mga konsentrasyon ng unsaturated fatty acid. . Ang mga fatty acid (monounsaturated + polyunsaturated) ay nangingibabaw pa rin. Ipinakita din ng pag-aaral na ang mga mealworm ay piling nag-iipon ng calcium, iron at manganese mula sa mga side stream na mayaman sa acidic na mineral. Ang bioavailability ng mga mineral ay lumilitaw na gumaganap ng isang mahalagang papel at karagdagang pag-aaral ay kinakailangan upang lubos na maunawaan ito. Ang mga mabibigat na metal na nasa gilid ng mga batis ay maaaring maipon sa mga mealworm. Gayunpaman, ang panghuling konsentrasyon ng Pb, Cd at Cr sa larval biomass ay mas mababa sa mga katanggap-tanggap na antas, na nagpapahintulot sa mga side stream na ito na ligtas na magamit bilang isang wet feed source.
Ang larvae ng mealworm ay pinalaki nina Radius (Giel, Belgium) at Inagro (Rumbeke-Beitem, Belgium) sa Thomas More University of Applied Sciences sa 27 °C at 60% relative humidity. Ang density ng mga mealworm na pinalaki sa isang 60 x 40 cm na aquarium ay 4.17 worm/cm2 (10,000 mealworms). Ang larvae ay unang pinakain ng 2.1 kg ng wheat bran bilang tuyong pagkain sa bawat tangke ng pagpapalaki at pagkatapos ay dinadagdagan kung kinakailangan. Ang mga bloke ng agar ay ginamit bilang isang control wet food treatment. Mula sa ika-4 na linggo, ang mga side stream (pinagmulan din ng moisture) ay pinakain bilang basang pagkain sa halip na agar ad libitum. Ang porsyento ng dry matter para sa bawat side stream ay paunang natukoy at naitala upang matiyak ang pantay na dami ng moisture para sa lahat ng mga insekto sa lahat ng paggamot. Ang pagkain ay ipinamamahagi nang pantay-pantay sa buong terrarium. Kinokolekta ang larvae kapag lumabas ang unang pupae sa eksperimentong grupo. Ang pag-aani ng larva ay ginagawa gamit ang 2 mm diameter na mechanical shaker. Maliban sa eksperimento na diced ng patatas. Ang malalaking bahagi ng pinatuyong patatas na diced ay pinaghihiwalay din sa pamamagitan ng pagpayag sa larvae na gumapang sa salaan na ito at pagkolekta ng mga ito sa isang metal tray. Ang kabuuang timbang ng ani ay natutukoy sa pamamagitan ng pagtimbang ng kabuuang timbang ng ani. Kinakalkula ang kaligtasan sa pamamagitan ng paghahati ng kabuuang timbang ng ani sa timbang ng larva. Natutukoy ang bigat ng larva sa pamamagitan ng pagpili ng hindi bababa sa 100 larvae at paghahati ng kanilang kabuuang timbang sa bilang. Ang mga nakolektang larvae ay gutom sa loob ng 24 na oras upang mawalan ng laman ang kanilang mga bituka bago ang pagsusuri. Sa wakas, ang mga larvae ay sinusuri muli upang paghiwalayin ang mga ito mula sa natitira. Ang mga ito ay na-freeze-ethanased at iniimbak sa -18°C hanggang sa pagsusuri.
Ang dry feed ay wheat bran (Belgian Molens Joye). Ang wheat bran ay pre-sifted sa laki ng butil na mas mababa sa 2 mm. Bilang karagdagan sa dry feed, ang mealworm larvae ay nangangailangan din ng wet feed upang mapanatili ang moisture at mineral supplement na kailangan ng mealworms. Ang wet feed ay higit sa kalahati ng kabuuang feed (dry feed + wet feed). Sa aming mga eksperimento, ginamit ang agar (Brouwland, Belgium, 25 g/l) bilang control wet feed45. Tulad ng ipinapakita sa Figure 1, apat na produktong pang-agrikultura na may iba't ibang nilalaman ng sustansya ang sinubukan bilang wet feed para sa mealworm larvae. Kabilang sa mga by-product na ito ang (a) mga dahon mula sa pagtatanim ng pipino (Inagro, Belgium), (b) mga pag-trim ng patatas (Duigny, Belgium), (c) fermented chicory roots (Inagro, Belgium) at (d) hindi nabentang prutas at gulay mula sa mga auction. . (Belorta, Belgium). Ang gilid na batis ay tinadtad sa mga piraso na angkop para gamitin bilang wet mealworm feed.
Mga produktong pang-agrikultura bilang wet feed para sa mealworms; (a) mga dahon ng hardin mula sa pagtatanim ng pipino, (b) mga pinagputulan ng patatas, (c) mga ugat ng chicory, (d) mga hindi nabentang gulay sa auction at (e) mga bloke ng agar. Bilang mga kontrol.
Ang komposisyon ng feed at mealworm larvae ay natukoy nang tatlong beses (n = 3). Ang mabilis na pagsusuri, komposisyon ng mineral, nilalaman ng mabibigat na metal at komposisyon ng fatty acid ay nasuri. Ang isang homogenized sample na 250 g ay kinuha mula sa nakolekta at nagutom na larvae, pinatuyo sa 60 ° C hanggang sa pare-pareho ang timbang, lupa (IKA, Tube mill 100) at sinala sa pamamagitan ng isang 1 mm salaan. Ang mga pinatuyong sample ay tinatakan sa madilim na mga lalagyan.
Natutukoy ang nilalaman ng dry matter (DM) sa pamamagitan ng pagpapatuyo ng mga sample sa isang oven sa 105°C sa loob ng 24 na oras (Memmert, UF110). Ang porsyento ng tuyong bagay ay kinakalkula batay sa pagbaba ng timbang ng sample.
Ang nilalaman ng krudo na abo (CA) ay tinutukoy ng pagkawala ng masa pagkatapos ng pagkasunog sa isang muffle furnace (Nabertherm, L9/11/SKM) sa 550°C sa loob ng 4 na oras.
Ang crude fat content o diethyl ether (EE) extraction ay isinagawa gamit ang petroleum ether (bp 40–60 °C) gamit ang Soxhlet extraction equipment. Humigit-kumulang 10 g ng sample ang inilagay sa ulo ng pagkuha at tinakpan ng ceramic na lana upang maiwasan ang pagkawala ng sample. Ang mga sample ay nakuha magdamag na may 150 ML petrolyo eter. Ang katas ay pinalamig, ang organikong solvent ay tinanggal at nakuhang muli sa pamamagitan ng rotary evaporation (Büchi, R-300) sa 300 mbar at 50 °C. Ang mga crude lipid o ether extract ay pinalamig at natimbang sa isang analytical na balanse.
Ang nilalaman ng krudo na protina (CP) ay natukoy sa pamamagitan ng pagsusuri sa nitrogen na naroroon sa sample gamit ang Kjeldahl method BN EN ISO 5983-1 (2005). Gamitin ang naaangkop na N hanggang P na mga kadahilanan upang kalkulahin ang nilalaman ng protina. Para sa karaniwang dry feed (wheat bran) gumamit ng kabuuang factor na 6.25. Para sa side stream isang factor na 4.2366 ang ginagamit at para sa vegetable mixtures isang factor na 4.3967 ang ginagamit. Ang krudo na nilalaman ng protina ng larvae ay kinakalkula gamit ang isang N hanggang P factor na 5.3351.
Kasama sa fiber content ang neutral na detergent fiber (NDF) na pagpapasiya batay sa Gerhardt extraction protocol (manual fiber analysis sa mga bag, Gerhardt, Germany) at ang van Soest 68 method. Para sa pagtukoy ng NDF, isang 1 g sample ang inilagay sa isang espesyal na fiber bag (Gerhardt, ADF/NDF bag) na may glass liner. Ang mga hibla na bag na puno ng mga sample ay unang tinanggalan ng taba ng petrolyo eter (pagkulo ng 40–60 °C) at pagkatapos ay pinatuyo sa temperatura ng silid. Ang defatted sample ay nakuha gamit ang isang neutral fiber detergent solution na naglalaman ng heat-stable na α-amylase sa kumukulong temperatura sa loob ng 1.5 h. Ang mga sample ay pagkatapos ay hugasan ng tatlong beses na may kumukulong deionized na tubig at tuyo sa 105 ° C magdamag. Ang mga tuyong fiber bag (naglalaman ng fiber residues) ay tinimbang gamit ang analytical balance (Sartorius, P224-1S) at pagkatapos ay sinunog sa isang muffle furnace (Nabertherm, L9/11/SKM) sa 550°C sa loob ng 4 na oras. Ang abo ay muling tinimbang at ang nilalaman ng hibla ay kinakalkula batay sa pagbaba ng timbang sa pagitan ng pagpapatuyo at pagsunog ng sample.
Upang matukoy ang nilalaman ng chitin ng larvae, gumamit kami ng isang binagong protocol batay sa pagsusuri ng crude fiber ni van Soest 68. Ang isang 1 g sample ay inilagay sa isang espesyal na fiber bag (Gerhardt, CF Bag) at isang glass seal. Ang mga sample ay inilagay sa mga fiber bag, na-defat sa petroleum ether (c. 40–60 °C) at pinatuyo sa hangin. Ang na-defatted sample ay unang nakuha gamit ang acidic solution na 0.13 M sulfuric acid sa kumukulong temperatura sa loob ng 30 min. Ang extraction fiber bag na naglalaman ng sample ay hinugasan ng tatlong beses na may kumukulong deionized na tubig at pagkatapos ay kinuha gamit ang 0.23 M potassium hydroxide solution sa loob ng 2 h. Ang extraction fiber bag na naglalaman ng sample ay muling binanlawan ng tatlong beses na may kumukulong deionized na tubig at pinatuyo sa 105°C magdamag. Ang dry bag na naglalaman ng fiber residue ay tinimbang sa analytical balance at sinunog sa muffle furnace sa 550°C sa loob ng 4 na oras. Ang abo ay tinimbang at ang nilalaman ng hibla ay kinakalkula batay sa pagbaba ng timbang ng sinunog na sample.
Kinakalkula ang kabuuang nilalaman ng carbohydrate. Ang non-fibrous carbohydrate (NFC) na konsentrasyon sa feed ay kinakalkula gamit ang NDF analysis, at ang konsentrasyon ng insekto ay kinakalkula gamit ang chitin analysis.
Ang pH ng matrix ay natukoy pagkatapos ng pagkuha ng deionized na tubig (1:5 v/v) ayon sa NBN EN 15933.
Ang mga sample ay inihanda tulad ng inilarawan ni Broeckx et al. Natukoy ang mga profile ng mineral gamit ang ICP-OES (Optima 4300™ DV ICP-OES, Perkin Elmer, MA, USA).
Ang mga mabibigat na metal na Cd, Cr at Pb ay sinuri ng graphite furnace atomic absorption spectrometry (AAS) (Thermo Scientific, ICE 3000 series, na nilagyan ng GFS furnace autosampler). Humigit-kumulang 200 mg ng sample ang hinukay sa acidic na HNO3/HCl (1:3 v/v) gamit ang mga microwave (CEM, MARS 5). Ang pagtunaw ng microwave ay isinagawa sa 190 ° C para sa 25 min sa 600 W. Dilute ang katas na may ultrapure na tubig.
Ang mga fatty acid ay tinutukoy ng GC-MS (Agilent Technologies, 7820A GC system na may 5977 E MSD detector). Ayon sa pamamaraan nina Joseph at Akman70, ang 20% BF3/MeOH solution ay idinagdag sa isang methanolic KOH solution at ang fatty acid methyl ester (FAME) ay nakuha mula sa ether extract pagkatapos ng esterification. Ang mga fatty acid ay maaaring matukoy sa pamamagitan ng paghahambing ng kanilang mga oras ng pagpapanatili sa 37 FAME mixture standards (Chemical Lab) o sa pamamagitan ng paghahambing ng kanilang MS spectra sa mga online na library gaya ng NIST database. Ang pagsusuri ng husay ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagkalkula ng peak area bilang isang porsyento ng kabuuang peak area ng chromatogram.
Ang pagsusuri ng data ay isinagawa gamit ang JMP Pro 15.1.1 software mula sa SAS (Buckinghamshire, UK). Ang pagsusuri ay isinagawa gamit ang one-way na pagsusuri ng pagkakaiba-iba na may antas ng kahalagahan na 0.05 at Tukey's HSD bilang isang post hoc test.
Ang bioaccumulation factor (BAF) ay kinakalkula sa pamamagitan ng paghahati ng konsentrasyon ng mabibigat na metal sa mealworm larval biomass (DM) sa konsentrasyon sa wet feed (DM) 43 . Ang isang BAF na higit sa 1 ay nagpapahiwatig na ang mga mabibigat na metal ay bioaccumulate mula sa wet feed sa larvae.
Ang mga dataset na nabuo at/o nasuri sa kasalukuyang pag-aaral ay makukuha mula sa kaukulang may-akda sa makatwirang kahilingan.
United Nations Department of Economic and Social Affairs, Population Division. World Population Prospects 2019: Mga Highlight (ST/ESA/SER.A/423) (2019).
Cole, MB, Augustine, MA, Robertson, MJ, at Manners, JM, Food safety science. NPJ Sci. Pagkain 2018, 2. https://doi.org/10.1038/s41538-018-0021-9 (2018).
Oras ng post: Dis-25-2024