Yaygın olarak çözünen karbonhidratlar, kara asker sineği larvası Hermetia illucens'in (Stratiomyidae) büyümesini, hayatta kalmasını ve yağ asidi profilini etkiler.

Nature.com'u ziyaret ettiğiniz için teşekkür ederiz. Kullandığınız tarayıcı sürümünün CSS desteği sınırlıdır. En iyi sonuçları elde etmek için daha yeni bir tarayıcı kullanmanızı (veya Internet Explorer'da uyumluluk modunu devre dışı bırakmanızı) öneririz. Bu arada desteğin devamını sağlamak için siteyi stiller ve JavaScript olmadan görüntüleyeceğiz.
Kara asker sineği (Hermetia illucens, L. 1758), karbonhidrat bakımından zengin organik yan ürünleri kullanma potansiyeli yüksek olan, omnivor, zararlı bir böcektir. Karbonhidratlar arasında kara asker sinekleri, büyüme ve lipit sentezi için çözünür şekerlere dayanır. Bu çalışmanın amacı, yaygın olarak kullanılan çözünür şekerlerin kara asker sineklerinin gelişimi, hayatta kalması ve yağ asidi profili üzerindeki etkilerini değerlendirmektir. Tavuk yemini ayrı ayrı monosakkaritler ve disakkaritlerle destekleyin. Selüloz kontrol olarak kullanıldı. Glikoz, fruktoz, sükroz ve maltozla beslenen larvalar, kontrol larvalarından daha hızlı büyüdü. Buna karşılık, laktozun larvalar üzerinde beslenme karşıtı bir etkisi vardı, büyümeyi yavaşlattı ve nihai bireysel vücut ağırlığını düşürdü. Bununla birlikte, tüm çözünür şekerler, larvaları kontrol diyetiyle beslenenlere göre daha şişman hale getirdi. Test edilen şekerler özellikle yağ asidi profilini şekillendirdi. Maltoz ve sükroz, selüloza kıyasla doymuş yağ asidi içeriğini arttırdı. Buna karşılık laktoz, diyetteki doymamış yağ asitlerinin biyolojik birikimini arttırdı. Bu çalışma, çözünür şekerin kara asker sineği larvalarının yağ asidi bileşimi üzerindeki etkisini ortaya koyan ilk çalışmadır. Sonuçlarımız, test edilen karbonhidratların kara asker sineği larvalarının yağ asidi bileşimi üzerinde önemli bir etkiye sahip olduğunu ve dolayısıyla bunların nihai uygulamasını belirleyebileceğini göstermektedir.
Enerji ve hayvansal proteine ​​yönelik küresel talep artmaya devam ediyor1. Küresel ısınma bağlamında üretimi artırırken fosil enerjiye ve geleneksel gıda üretim yöntemlerine daha yeşil alternatifler bulmak zorunludur. Böcekler, geleneksel hayvancılıkla karşılaştırıldığında daha düşük kimyasal bileşimleri ve çevresel etkileri nedeniyle bu sorunların çözümü için umut verici adaylardır2. Böcekler arasında, bu sorunları çözmeye yönelik mükemmel bir aday, çeşitli organik substratlarla beslenebilen zararlı bir tür olan Hermetia illucens (L. 1758) kara asker sineği (BSF)'dir3. Bu nedenle, bu substratların BSF ıslahı yoluyla değerlendirilmesi, çeşitli endüstrilerin ihtiyaçlarını karşılayacak yeni bir hammadde kaynağı yaratabilir.
BSF larvaları (BSFL), yüksek karbonhidrat (CH)4,5 nedeniyle BSFL büyümesi için özellikle uygun olan bira tahılları, sebze artıkları, meyve posası ve bayat ekmek gibi tarımsal ve tarımsal endüstriyel yan ürünlerle beslenebilir. 6 içerik. BSFL'nin büyük ölçekli üretimi iki ürünün oluşumuyla sonuçlanır: bitki yetiştiriciliği7 için gübre olarak kullanılabilen substrat kalıntıları ve dışkı karışımı olan dışkı ve esas olarak proteinler, lipitler ve kitinden oluşan larvalar. Proteinler ve lipitler esas olarak hayvancılıkta, biyoyakıtta ve kozmetikte kullanılmaktadır8,9. Kitine gelince, bu biyopolimer tarım-gıda sektöründe, biyoteknolojide ve sağlık hizmetlerinde10 uygulama alanı bulmaktadır.
BSF, otojen bir holometabol böcektir; bu, metamorfozunun ve üremesinin, özellikle de böceğin yaşam döngüsünün enerji tüketen aşamalarının, larva büyümesi sırasında üretilen besin rezervleri tarafından tamamen desteklenebileceği anlamına gelir11. Daha spesifik olarak, protein ve lipit sentezi, BSF'nin beslenme dışı aşamaları sırasında enerji açığa çıkaran önemli bir depolama organı olan yağ gövdesinin gelişmesine yol açar: prepupa (yani, BSF larvalarının beslenirken ve ararken siyaha döndüğü son larva aşaması). metamorfoz için uygun bir ortam için), pupalar (yani böceğin metamorfoza uğradığı hareketsiz aşama) ve yetişkinler12,13. CH, BSF14 diyetindeki ana enerji kaynağıdır. Bu besinler arasında hemiselüloz, selüloz ve lignin gibi lifli CH, disakkaritler ve polisakkaritlerin (nişasta gibi) aksine BSFL15,16 tarafından sindirilemez. CH'nin sindirimi, sonuçta bağırsakta basit şekerlere hidrolize olan karbonhidratların emilimi için önemli bir ön adımdır16. Basit şekerler daha sonra emilebilir (yani bağırsak peritrofik zarı yoluyla) ve enerji üretmek üzere metabolize edilebilir17. Yukarıda bahsedildiği gibi larvalar fazla enerjiyi yağ gövdesinde lipitler olarak depolar12,18. Depolama lipitleri, larvalar tarafından diyetteki basit şekerlerden sentezlenen trigliseritlerden (bir gliserol molekülü ve üç yağ asidinden oluşan nötr lipitler) oluşur. Bu CH, yağ asidi sentazı ve tioesteraz yolları19 yoluyla yağ asidi (FA) biyosentezi için gerekli olan asetil-CoA substratlarını sağlar. H. illucens lipitlerinin yağ asidi profili doğal olarak yüksek oranda laurik asit (C12:0)19,20 içeren doymuş yağ asitleri (SFA) tarafından yönetilir. Bu nedenle, yüksek lipid içeriği ve yağ asidi bileşimi, özellikle çoklu doymamış yağ asitlerine (PUFA) ihtiyaç duyulan su ürünleri yetiştiriciliğinde, hayvan yemlerinde bütün larvaların kullanımı için hızla sınırlayıcı faktörler haline gelmektedir21.
BSFL'nin organik atığı azaltma potansiyelinin keşfedilmesinden bu yana, çeşitli yan ürünlerin değeri üzerine yapılan çalışmalar, BSFL'nin bileşiminin kısmen diyet tarafından düzenlendiğini göstermiştir. Şu anda H. illucens'in FA profilinin düzenlenmesi gelişmeye devam ediyor. BSFL'nin PUFA'yı biyolojik olarak biriktirme yeteneği, algler, balık atıkları veya keten tohumu gibi unlar gibi PUFA açısından zengin substratlar üzerinde gösterilmiştir; bu, hayvan beslenmesi için daha yüksek kaliteli bir FA profili sağlar19,22,23. Buna karşılık, PUFA açısından zenginleştirilmemiş yan ürünler için, diyet FA profilleri ile larva FA arasında her zaman bir korelasyon yoktur, bu da diğer besinlerin etkisine işaret eder24,25. Aslında sindirilebilir CH'nin FA profilleri üzerindeki etkisi yeterince anlaşılmamış ve yeterince araştırılmamıştır24,25,26,27.
Bildiğimiz kadarıyla, H. illucens'in diyetinde toplam monosakkaritler ve disakkaritler bol miktarda bulunsa da, H. illucens'in beslenmesindeki beslenme rolleri tam olarak anlaşılmamıştır. Bu çalışmanın amacı bunların BSFL beslenmesi ve lipid kompozisyonu üzerindeki etkilerini açıklamaktır. Farklı beslenme koşulları altında larvaların büyümesini, hayatta kalmasını ve üretkenliğini değerlendireceğiz. Daha sonra, CH'nin BSFL beslenme kalitesi üzerindeki etkilerini vurgulamak için her diyetin lipit içeriğini ve yağ asidi profilini tanımlayacağız.
Test edilen CH'nin doğasının (1) larva büyümesini, (2) toplam lipit seviyelerini etkileyeceğini ve (3) FA profilini modüle edeceğini varsaydık. Monosakkaritler doğrudan emilebilirken disakkaritlerin hidrolize edilmesi gerekir. Dolayısıyla monosakaritler, FA sentaz ve tiyoesteraz yolları aracılığıyla lipogenez için doğrudan enerji kaynakları veya öncüller olarak daha fazla kullanılabilir hale gelir, böylece H. illucens larva büyümesini arttırır ve rezerv lipitlerin (özellikle laurik asit) birikimini teşvik eder.
Test edilen CH, büyüme sırasında larvaların ortalama vücut ağırlığını etkiledi (Şekil 1). FRU, GLU, SUC ve MAL, kontrol diyetine (CEL) benzer şekilde larva vücut ağırlığını arttırdı. Buna karşılık LAC ve GAL'in larva gelişimini geciktirdiği görüldü. Özellikle LAC, büyüme dönemi boyunca SUC'ye kıyasla larva büyümesi üzerinde önemli bir olumsuz etkiye sahipti: 3. günde 9.16 ± 1.10 mg'a karşı 15.00 ± 1.01 mg (F6,21 = 12.77, p < 0.001; Şekil 1), 125.11 ± 4.26 günde sırasıyla mg ve 211,79 ± 14,93 mg 17 (F6,21 = 38,57, p < 0,001; Şekil 1).
Kontrol olarak farklı monosakkaritler (fruktoz (FRU), galaktoz (GAL), glukoz (GLU)) disakkaritler (laktoz (LAC), maltoz (MAL), sükroz (SUC)) ve selüloz (CEL) kullanılır. Siyah asker sineği larvalarıyla beslenen larvaların büyümesi. Eğri üzerindeki her nokta, 100 larvalık bir popülasyondan (n = 4) rastgele seçilen 20 larvanın tartılmasıyla hesaplanan ortalama bireysel ağırlığı (mg) temsil eder. Hata çubukları SD'yi temsil eder.
CEL diyeti %95,5 ± 3,8 oranında mükemmel larva sağkalımı sağladı. Ayrıca, çözünebilir CH içeren diyetlerle beslenen H. illucens'in hayatta kalma oranı azaldı (GLM: χ = 107.13, df = 21, p < 0.001), bu durum çalışılan CH'de MAL ve SUC'nin (disakkaritler) neden olduğu bir azalmaydı. Ölüm oranı GLU, FRU, GAL (monosakarit) ve LAC'den daha düşüktü (EMM: p < 0,001, Şekil 2).
Kontrol olarak çeşitli monosakkaritler (fruktoz, galaktoz, glikoz), disakkaritler (laktoz, maltoz, sukroz) ve selüloz ile tedavi edilen siyah asker sineği larvalarının hayatta kalma grafiği. Aynı harfle gösterilen tedaviler arasında anlamlı bir fark yoktur (EMM, p > 0,05).
Test edilen tüm diyetler larvaların pupa öncesi aşamaya erişmesine izin verdi. Ancak test edilen CH'ler larva gelişimini uzatma eğilimindeydi (F6,21=9.60, p<0.001; Tablo 1). Özellikle, GAL ve LAC ile beslenen larvaların, CEL'de yetiştirilen larvalarla karşılaştırıldığında pupa öncesi aşamaya ulaşması daha uzun sürdü (CEL-GAL: p<0,001; CEL-LAC: p<0,001; Tablo 1).
Test edilen CH'nin larva vücut ağırlığı üzerinde de farklı etkileri vardı; CEL diyetiyle beslenen larvaların vücut ağırlığı 180,19 ± 11,35 mg'a ulaştı (F6,21 = 16,86, p < 0,001; Şekil 3). FRU, GLU, MAL ve SUC, 200 mg'ın üzerinde ortalama nihai larva vücut ağırlığı ile sonuçlandı; bu, CEL'inkinden önemli ölçüde daha yüksekti (p < 0.05). Buna karşılık, GAL ve LAC ile beslenen larvalar daha düşük vücut ağırlığına sahipti; sırasıyla ortalama 177,64 ± 4,23 mg ve 156,30 ± 2,59 mg (p < 0,05). Bu etki, nihai vücut ağırlığının kontrol diyetine göre daha düşük olduğu LAC ile daha belirgindi (CEL-LAC: fark = 23,89 mg; p = 0,03; Şekil 3).
Farklı monosakkaritler (fruktoz, galaktoz, glikoz), disakkaritler (laktoz, maltoz, sukroz) ve selüloz (kontrol olarak) ile beslenen, larva lekeleri (mg) ve histogram (g) olarak ifade edilen siyah asker sinekleri olarak ifade edilen bireysel larvaların ortalama nihai ağırlığı. Sütunlu harfler, toplam larva ağırlığında önemli ölçüde farklı olan grupları temsil eder (p < 0,001). Larva lekeleriyle ilişkili harfler, önemli ölçüde farklı bireysel larva ağırlıklarına sahip grupları temsil eder (p < 0,001). Hata çubukları SD'yi temsil eder.
Maksimum bireysel ağırlık, maksimum nihai toplam larva kolonisi ağırlığından bağımsızdı. Aslında FRU, GLU, MAL ve SUC içeren diyetler, CEL'e kıyasla tankta üretilen toplam larva ağırlığını artırmadı (Şekil 3). Ancak LAC, toplam ağırlığı önemli ölçüde azalttı (CEL-LAC: fark = 9,14 g; p < 0,001; Şekil 3).
Tablo 1 verimi (larva/gün) göstermektedir. İlginç bir şekilde CEL, MAL ve SUC'nin optimal getirileri benzerdi (Tablo 1). Buna karşılık FRU, GAL, GLU ve LAC, CEL'e kıyasla verimi azalttı (Tablo 1). GAL ve LAC en kötü performansı sergiledi: verim yarıya inerek sırasıyla yalnızca 0,51 ± 0,09 g larva/gün ve 0,48 ± 0,06 g larva/gün oldu (Tablo 1).
Monosakkaritler ve disakkaritler, CF larvalarının lipit içeriğini arttırdı (Tablo 1). CLE diyetinde, DM içeriğinin %23,19 ± 0,70'i kadar lipit içeriğine sahip larvalar elde edildi. Karşılaştırma amacıyla, çözünür şekerle beslenen larvalardaki ortalama lipit içeriği %30'dan fazlaydı (Tablo 1). Ancak test edilen CH'lerin yağ içerikleri aynı ölçüde arttı.
Beklendiği gibi, CG denekleri larvaların FA profilini değişen derecelerde etkiledi (Şekil 4). SFA içeriği tüm diyetlerde yüksekti ve %60'ın üzerine ulaştı. MAL ve SUC, FA profilini dengesiz hale getirdi ve bu da SFA içeriğinde artışa yol açtı. MAL durumunda, bir yandan bu dengesizlik ağırlıklı olarak tekli doymamış yağ asitleri (MUFA) içeriğinde bir azalmaya yol açtı (F6,21 = 7.47; p < 0.001; Şekil 4). Öte yandan SUC için MUFA ve PUFA arasındaki düşüş daha düzgündü. LAC ve MAL, FA spektrumu üzerinde zıt etkilere sahipti (SFA: F6,21 = 8,74; p < 0,001; MUFA: F6,21 = 7,47; p < 0,001; PUFA: χ2 = 19,60; Df = 6; p < 0,001; Şekil 4). LAC ile beslenen larvalarda SFA oranının düşük olması, MUFA içeriğini arttırıyor gibi görünmektedir. Özellikle, LAC ile beslenen larvalarda MUFA seviyeleri, GAL dışındaki diğer çözünür şekerlerle karşılaştırıldığında daha yüksekti (F6,21 = 7.47; p < 0.001; Şekil 4).
Farklı monosakkaritler (fruktoz (FRU), galaktoz (GAL), glikoz (GLU))), disakkaritler (laktoz (LAC), maltoz (MAL), sükroz (SUC)) ve selülozun (CEL) kontrol olarak kullanılması, yağ asidinin kutu grafiği siyah asker sinek larvalarına beslenen bileşim. Sonuçlar toplam FAME'in yüzdesi olarak ifade edilir. Farklı harflerle işaretlenen tedaviler önemli ölçüde farklıdır (p < 0,001). (a) Doymuş yağ asitlerinin oranı; (b) Tekli doymamış yağ asitleri; (c) Çoklu doymamış yağ asitleri.
Tanımlanan yağ asitleri arasında laurik asit (C12:0) gözlemlenen tüm spektrumlarda (%40'tan fazla) baskındı. Mevcut diğer SFA'lar palmitik asit (C16:0) (%10'dan az), stearik asit (C18:0) (%2,5'ten az) ve kaprik asittir (C10:0) (%1,5'ten az). MUFA'lar esas olarak oleik asit (C18:1n9) (%9,5'ten az) ile temsil edilirken, PUFA'lar esas olarak linoleik asitten (C18:2n6) (%13,0'dan az) oluşmuştur (bkz. Ek Tablo S1). Ek olarak, özellikle tanımlanamayan bileşik numarası 9'un (UND9) ortalama% 2,46 ± 0,52'yi oluşturduğu CEL larvalarının spektrumlarında küçük bir bileşik oranı tanımlanamamıştır (bakınız Ek Tablo S1). GC × GC-FID analizi, bunun beş veya altı çift bağa sahip 20 karbonlu bir yağ asidi olabileceğini öne sürdü (bakınız Ek Şekil S5).
PERMANOVA analizi, yağ asidi profillerine göre üç farklı grup ortaya çıkardı (F6,21 = 7,79, p < 0,001; Şekil 5). TBC spektrumunun temel bileşen analizi (PCA) bunu göstermektedir ve iki bileşenle açıklanmaktadır (Şekil 5). Ana bileşenler varyansın %57,9'unu açıkladı ve önem sırasına göre laurik asit (C12:0), oleik asit (C18:1n9), palmitik asit (C16:0), stearik asit (C18:0) ve linolenik asit (C18:3n3) (bkz. Şekil S4). İkinci bileşen, varyansın %26,3'ünü açıkladı ve önem sırasına göre dekanoik asit (C10:0) ve linoleik asidi (C18:2n6 cis) içeriyordu (bkz. Ek Şekil S4). Basit şekerler (FRU, GAL ve GLU) içeren diyetlerin profilleri benzer özellikler gösterdi. Buna karşılık disakkaritler farklı profiller ortaya çıkardı: bir yanda MAL ve SUC, diğer yanda LAC. Özellikle MAL, CEL'e kıyasla FA profilini değiştiren tek şekerdi. Ayrıca MAL profili FRU ve GLU profillerinden önemli ölçüde farklıydı. Özellikle MAL profili en yüksek C12:0 oranını (%54,59 ± 2,17) gösterdi; bu da onu CEL (%43,10 ± 5,01), LAC (%43,35 ± 1,31), FRU (%48,90 ± 1,97) ve FRU (%48,90 ± 1,97) ile karşılaştırılabilir kılıyor. GLU (%48,38 ± %2,17) profilleri (bkz. Ek Tablo S1). MAL spektrumu ayrıca en düşük C18:1n9 içeriğini (%9,52 ± 0,50) gösterdi; bu da onu LAC (%12,86 ± %0,52) ve CEL (%12,40 ± 1,31) spektrumlarından daha da farklılaştırdı. Benzer bir eğilim C16:0 için de gözlendi. İkinci bileşende, LAC spektrumu en yüksek C18:2n6 içeriğini (%17,22 ± 0,46) gösterirken, MAL en düşük içeriği (%12,58 ± 0,67) gösterdi. C18:2n6 ayrıca LAC'yi daha düşük seviyeler (%13.41 ± %2.48) gösteren kontrolden (CEL) farklılaştırdı (bakınız Ek Tablo S1).
Farklı monosakkaritler (fruktoz, galaktoz, glikoz), disakkaritler (laktoz, maltoz, sukroz) ve kontrol olarak selüloz içeren siyah asker sinek larvalarının yağ asidi profilinin PCA grafiği.
Çözünür şekerlerin H. illucens larvaları üzerindeki besinsel etkilerini incelemek için tavuk yemindeki selüloz (CEL), glikoz (GLU), fruktoz (FRU), galaktoz (GAL), maltoz (MAL), sükroz (SUC) ve sukroz (SUC) ile değiştirildi. laktoz (LAC). Ancak monosakkaritler ve disakkaritlerin HF larvalarının gelişimi, hayatta kalması ve bileşimi üzerinde farklı etkileri vardı. Örneğin, GLU, FRU ve bunların disakkarit formları (MAL ve SUC), larva büyümesi üzerinde olumlu destekleyici etkiler göstererek CEL'den daha yüksek nihai vücut ağırlığına ulaşmalarına olanak sağladı. Sindirilemeyen CEL'in aksine, GLU, FRU ve SUC bağırsak bariyerini aşabilir ve formüle edilmiş diyetlerde önemli besin kaynakları olarak hizmet edebilir16,28. MAL'ın belirli hayvan taşıyıcıları yoktur ve asimilasyondan önce iki glikoz molekülüne hidrolize olduğu düşünülmektedir15. Bu moleküller böceğin vücudunda doğrudan enerji kaynağı olarak veya lipitler18olarak depolanır. Birincisi, ikincisi ile ilgili olarak, gözlemlenen mod içi farklılıkların bazıları cinsiyet oranlarındaki küçük farklılıklardan kaynaklanıyor olabilir. Aslında H. illucens'te üreme tamamen kendiliğinden gerçekleşebilir: yetişkin dişiler doğal olarak yeterli yumurtlama rezervine sahiptir ve erkeklerden daha ağırdır29. Bununla birlikte, BSFL'deki lipit birikimi, daha önce GLU ve ksiloz26,30 için gözlemlendiği gibi diyetle çözünebilen CH2 alımıyla ilişkilidir. Örneğin Li ve ark.30 larva diyetine %8 GLU eklendiğinde BSF larvalarının lipit içeriğinin kontrollere kıyasla %7,78 arttığını gözlemlemiştir. Sonuçlarımız bu gözlemlerle tutarlıdır; çözünebilir şekerle beslenen larvalardaki yağ içeriğinin, GLU takviyesiyle %8,57'lik bir artışa kıyasla CEL diyetiyle beslenen larvalardan daha yüksek olduğunu gösterir. Şaşırtıcı bir şekilde, larva büyümesi, nihai vücut ağırlığı ve hayatta kalma üzerindeki olumsuz etkilere rağmen, GAL ve LAC ile beslenen larvalarda benzer sonuçlar gözlemlendi. LAC ile beslenen larvalar, CEL diyetiyle beslenenlerden önemli ölçüde daha küçüktü ancak yağ içerikleri, diğer çözünür şekerlerle beslenen larvalarla karşılaştırılabilir düzeydeydi. Bu sonuçlar laktozun BSFL üzerindeki antibeslenme etkilerini vurgulamaktadır. İlk olarak, diyet büyük miktarda CH içerir. Sırasıyla monosakkaritler ve disakkaritlerin emilim ve hidroliz sistemleri doygunluğa ulaşarak asimilasyon sürecinde darboğazlara neden olabilir. Hidroliz ise a- ve β-glukosidazlar 31 tarafından gerçekleştirilir. Bu enzimler, boyutlarına ve kurucu monosakkaritler 15 arasındaki kimyasal bağlara (α veya β bağlantıları) bağlı olarak tercih edilen substratlara sahiptir. LAC'nin GLU ve GAL'e hidrolizi, BSF32'nin bağırsaklarında aktivitesi kanıtlanmış bir enzim olan β-galaktosidaz tarafından gerçekleştirilir. Ancak larvaların tükettiği LAC miktarıyla karşılaştırıldığında ekspresyonu yetersiz olabilir. Buna karşılık, böceklerde bol miktarda ifade edildiği bilinen a-glukosidaz maltaz ve sükraz 15, büyük miktarlarda MAL ve sükroz SUC'yi parçalayabilir, böylece bu doyurucu etkiyi sınırlayabilir. İkincisi, antibeslenme etkileri, diğer tedavilere kıyasla böceklerin bağırsak amilaz aktivitesinin uyarılmasının azalmasına ve beslenme davranışının yavaşlamasına bağlı olabilir. Aslında, çözünür şekerlerin, amilaz gibi böcek sindirimi için önemli olan enzim aktivitesinin uyarıcıları ve beslenme tepkisinin tetikleyicileri olduğu tespit edilmiştir33,34,35. Uyarının derecesi şekerin moleküler yapısına bağlı olarak değişir. Aslında disakkaritler emilmeden önce hidrolize ihtiyaç duyarlar ve amilazı kendilerini oluşturan monosakaritlerden daha fazla uyarma eğilimindedirler34. Buna karşılık, LAC'ın daha hafif bir etkisi vardır ve çeşitli türlerde böcek büyümesini desteklemede yetersiz olduğu bulunmuştur33,35. Örneğin, Spodoptera exigua (Boddie 1850) zararlısında, tırtıl orta bağırsak enzimlerinin ekstraktlarında LAC'ın hiçbir hidrolitik aktivitesi tespit edilmedi36.
FA spektrumuyla ilgili olarak, sonuçlarımız test edilen CH'nin önemli modülatör etkilerini göstermektedir. Özellikle laurik asit (C12:0) diyetteki toplam FA'nın %1'inden azını oluştursa da, tüm profillerde baskındı (bkz. Ek Tablo S1). Bu, laurik asidin H. illucens'teki diyetteki CH'den, asetil-CoA karboksilaz ve FA sentaz19,27,37 içeren bir yol yoluyla sentezlendiğine dair önceki verilerle tutarlıdır. Sonuçlarımız, CEL'in büyük ölçüde sindirilemez olduğunu ve birçok BSFL çalışmasında38,39,40 tartışıldığı gibi BSF kontrol diyetlerinde "hacim artırıcı ajan" olarak görev yaptığını doğrulamaktadır. CEL'in LAC dışındaki monosakkaritler ve disakkaritlerle değiştirilmesi C12:0 oranını arttırdı, bu da larvalar tarafından CH alımının arttığını gösteriyor. İlginç bir şekilde, MAL ve SUC disakkaritleri, laurik asit sentezini kendilerini oluşturan monosakaritlerden daha verimli bir şekilde teşvik eder; bu, GLU ve FRU'nun daha yüksek polimerizasyon derecesine rağmen ve Drosophila'nın hayvan protein türlerinde tanımlanan tek sakaroz taşıyıcısı olması nedeniyle disakkarit taşıyıcılarının da olduğunu düşündürür. H. illucens larvalarının bağırsaklarında bulunmayabilir15, GLU ve FRU'nun kullanımı artar. Bununla birlikte, GLU ve FRU teorik olarak BSF tarafından daha kolay metabolize edilse de, substratlar ve bağırsak mikroorganizmaları tarafından da daha kolay metabolize edilirler; bu da onların daha hızlı bozunmasına ve disakkaritlere kıyasla larvalar tarafından kullanımının azalmasına neden olabilir.
İlk bakışta, LAC ve MAL ile beslenen larvaların lipit içeriği karşılaştırılabilir düzeydeydi; bu, bu şekerlerin benzer biyoyararlanımını gösteriyordu. Ancak şaşırtıcı bir şekilde LAC'ın FA profili, MAL ile karşılaştırıldığında özellikle daha düşük C12:0 içeriğiyle SFA'da daha zengindi. Bu farkı açıklayan bir hipotez, LAC'ın asetil-CoA FA sentaz yoluyla diyetteki FA'nın biyobirikimini uyarabilmesidir. Bu hipotezi destekleyen LAC larvaları, CEL diyetinden (%1,27 ± 0,16) en düşük dekanoat (C10:0) oranına (%0,77 ± 0,13) sahipti, bu da FA sentaz ve tiyoesteraz aktivitelerinin azaldığını gösteriyor19. İkincisi, diyetteki yağ asitlerinin H. illucens27'nin SFA kompozisyonunu etkileyen ana faktör olduğu düşünülmektedir. Deneylerimizde, linoleik asit (C18:2n6) diyetteki yağ asitlerinin %54,81'ini oluşturuyordu; LAC larvalarındaki oran %17,22 ± 0,46 ve MAL'deki oran %12,58 ± 0,67 idi. Oleik asit (cis + trans C18:1n9) (diyette %23,22) benzer bir eğilim gösterdi. α-linolenik asit oranı (C18:3n3) da biyobirikim hipotezini desteklemektedir. Bu yağ asidinin, keten tohumu küspesinin eklenmesi gibi substrat zenginleştirmesi üzerine larvalardaki toplam yağ asitlerinin %6-9'una kadar BSFL'de biriktiği bilinmektedir19. Zenginleştirilmiş diyetlerde C18:3n3, toplam diyet yağ asitlerinin %35'ine kadarını oluşturabilir. Ancak çalışmamızda C18:3n3 yağ asidi profilinin yalnızca %2,51'ini oluşturuyordu. Doğada bulunan oran larvalarımızda daha düşük olmasına rağmen, bu oran LAC larvalarında (%0,87 ± %0,02) MAL'a (%0,49 ± %0,04) göre daha yüksekti (p <0,001; bakınız Ek Tablo S1). CEL diyetinin orta oranı %0,72 ± 0,18'di. Son olarak, CF larvalarındaki palmitik asit (C16:0) oranı, sentetik yolların ve diyetteki FA19'un katkısını yansıtmaktadır. Hoc ve ark. 19, diyet keten tohumu küspesi ile zenginleştirildiğinde C16:0 sentezinin azaldığını gözlemledi; bu, CH oranındaki bir azalmaya bağlı olarak asetil-CoA substratının kullanılabilirliğindeki bir azalmaya atfedildi. Şaşırtıcı bir şekilde, her iki diyet de benzer CH içeriğine sahip olmasına ve MAL daha yüksek biyoyararlanım göstermesine rağmen, MAL larvaları en düşük C16:0 oranını (%10.46 ± 0.77) gösterirken, LAC %12.85 ± 0.27'ye karşılık gelen daha yüksek bir oran gösterdi (p < 0.05; bkz. Ek Tablo S1). Bu sonuçlar besinlerin BSFL sindirimi ve metabolizması üzerindeki karmaşık etkisini vurgulamaktadır. Şu anda bu konuyla ilgili araştırmalar Lepidoptera'da Diptera'ya göre daha kapsamlıdır. Tırtıllarda LAC'ın, SUC ve FRU34,35 gibi diğer çözünür şekerlerle karşılaştırıldığında zayıf bir beslenme davranışı uyarıcısı olduğu belirlendi. Özellikle Spodopteralittoralis'te (Boisduval 1833) MAL tüketimi bağırsaktaki amilolitik aktiviteyi LAC34'ten daha fazla uyarmıştır. BSFL'deki benzer etkiler, bağırsakta emilen CH'nin artması, uzun süreli beslenme ve bağırsak amilaz etkisi ile ilişkili olan MAL larvalarında C12:0 sentetik yolunun artan uyarılmasını açıklayabilir. LAC varlığında beslenme ritminin daha az uyarılması, LAC larvalarının daha yavaş büyümesini de açıklayabilir. Ayrıca Liu Yanxia ve ark. 27, H. illucens substratlarındaki lipitlerin raf ömrünün CH'ninkinden daha uzun olduğunu kaydetti. Bu nedenle, LAC larvaları gelişimlerini tamamlamak için diyet lipitlerine daha fazla güvenebilir, bu da nihai lipit içeriğini artırabilir ve yağ asidi profillerini modüle edebilir.
Bildiğimiz kadarıyla, sadece birkaç çalışma BSF diyetlerine monosakkarit ve disakkarit ilavesinin FA profilleri üzerindeki etkilerini test etmiştir. İlk olarak Li ve ark. 30, GLU ve ksilozun etkilerini değerlendirdi ve %8'lik bir ekleme oranında bizimkine benzer lipit seviyelerini gözlemledi. FA profili ayrıntılı değildi ve esas olarak SFA'dan oluşuyordu, ancak iki şeker arasında veya aynı anda sunulduklarında herhangi bir fark bulunamadı30. Ayrıca Cohn ve ark. 41, tavuk yemine %20 GLU, SUC, FRU ve GAL ilavesinin ilgili FA profilleri üzerinde hiçbir etkisi olmadığını gösterdi. Bu spektrumlar biyolojik kopyalardan ziyade teknik kopyalardan elde edilmiştir ve yazarlar tarafından açıklandığı gibi istatistiksel analizi sınırlayabilir. Ayrıca izo-şeker kontrolünün olmaması (CEL kullanılarak) sonuçların yorumlanmasını sınırlar. Son zamanlarda Nugroho RA ve ark. FA spektrumlarında anormallikler göstermiştir42,43. İlk çalışmada Nugroho RA ve ark. 43 fermente hurma çekirdeği ununa FRU eklemenin etkisini test etti. Ortaya çıkan larvaların FA profili, %90'dan fazlasının %10 FRU içeren diyetten elde edilen anormal derecede yüksek PUFA seviyeleri gösterdi (çalışmamıza benzer). Her ne kadar bu diyet PUFA açısından zengin balık peletleri içerse de, %100 fermente PCM'den oluşan kontrol diyetindeki larvaların bildirilen FA profil değerleri, daha önce bildirilen herhangi bir profille, özellikle de 17.77'lik anormal C18:3n3 seviyesiyle tutarlı değildi. Nadir bir linoleik izomeri olan konjuge linoleik asit (C18:2n6t) için ± %1,67 ve 26,08 ± %0,20 asit. İkinci çalışma fermente hurma çekirdeği küspesinde FRU, GLU, MAL ve SUC42 dahil benzer sonuçlar gösterdi. Bu çalışmalar, bizimki gibi, kontrol seçimleri, diğer besin kaynaklarıyla etkileşimler ve FA analiz yöntemleri gibi BSF larva diyeti denemelerinden elde edilen sonuçların karşılaştırılmasında ciddi zorlukların altını çiziyor.
Deneyler sırasında substratın renginin ve kokusunun kullanılan diyete bağlı olarak değiştiğini gözlemledik. Bu durum larvaların substratında ve sindirim sisteminde gözlemlenen sonuçlarda mikroorganizmaların rol oynayabileceğini düşündürmektedir. Aslında monosakkaritler ve disakkaritler kolonileşen mikroorganizmalar tarafından kolayca metabolize edilir. Çözünür şekerlerin mikroorganizmalar tarafından hızla tüketilmesi, etanol, laktik asit, kısa zincirli yağ asitleri (örn. asetik asit, propiyonik asit, bütirik asit) ve karbondioksit44 gibi mikrobiyal metabolik ürünlerin büyük miktarlarda salınmasına neden olabilir44. Bu bileşiklerin bazıları, benzer gelişim koşulları altında Cohn ve ark.41 tarafından da gözlemlenen larvalar üzerindeki öldürücü toksik etkilerden sorumlu olabilir. Örneğin etanol böceklere zararlıdır45. Büyük miktarlarda karbondioksit emisyonu, tankın tabanında birikmesine neden olabilir ve hava sirkülasyonunun salınmasına izin vermemesi durumunda atmosferin oksijenden yoksun kalmasına neden olabilir. SCFA'lara ilişkin olarak, laktik asit, propiyonik asit ve bütirik asidin Callosobruchus maculatus'ta (Fabricius 1775)46 öldürücü olduğu gösterilmiş olmasına rağmen, bunların böcekler, özellikle de H. illucens üzerindeki etkileri tam olarak anlaşılamamıştır. Drosophila melanogaster Meigen 1830'da bu SCFA'lar dişileri yumurtlama bölgelerine yönlendiren koku belirteçleridir ve larva gelişiminde faydalı bir rol olduğunu düşündürür47. Ancak asetik asit tehlikeli bir madde olarak sınıflandırılır ve larva gelişimini önemli ölçüde engelleyebilir47. Buna karşılık, mikrobiyal olarak türetilmiş laktatın yakın zamanda Drosophila48'deki istilacı bağırsak mikroplarına karşı koruyucu bir etkiye sahip olduğu bulunmuştur. Ayrıca böceklerde CH sindiriminde sindirim sistemindeki mikroorganizmalar da rol oynamaktadır49. SCFA'ların beslenme hızı ve gen ekspresyonu gibi bağırsak mikrobiyotası üzerindeki fizyolojik etkileri omurgalılarda 50 açıklanmıştır. Ayrıca H. illucens larvaları üzerinde trofik bir etkiye sahip olabilirler ve FA profillerinin düzenlenmesine kısmen katkıda bulunabilirler. Bu mikrobiyal fermantasyon ürünlerinin besinsel etkileri üzerine yapılan çalışmalar, bunların H. illucens beslenmesi üzerindeki etkilerini açıklığa kavuşturacak ve gelişimleri ve FA açısından zengin substratların değeri açısından yararlı veya zararlı mikroorganizmalar üzerine gelecekteki çalışmalara temel oluşturacaktır. Bu bağlamda, toplu olarak yetiştirilen böceklerin sindirim süreçlerinde mikroorganizmaların rolü giderek daha fazla araştırılmaktadır. Böcekler, böceklerin sindirimi zor olan besin maddelerinin parçalanması veya detoksifikasyonunda uzmanlaşmış mikroorganizmaların gelişimini kolaylaştıran pH ve oksijenasyon koşullarını sağlayan biyoreaktörler olarak görülmeye başlanmıştır51. Son zamanlarda Xiang ve ark.52, örneğin organik atıkların bakteriyel bir karışımla aşılanmasının, CF'nin lignoselüloz bozunmasında uzmanlaşmış bakterileri çekmesine olanak sağladığını ve larvasız substratlarla karşılaştırıldığında substrattaki bozunmayı iyileştirdiğini gösterdi.
Son olarak, H. illucens tarafından organik atıkların faydalı kullanımına ilişkin olarak, CEL ve SUC diyetleri günde en yüksek sayıda larva üretti. Bu, bireysel bireylerin daha düşük nihai ağırlığına rağmen, sindirilemeyen CH'den oluşan bir substrat üzerinde üretilen toplam larva ağırlığının, monosakkaritler ve disakkaritler içeren bir homosakkarit diyetinde elde edilenle karşılaştırılabilir olduğu anlamına gelir. Çalışmamızda diğer besin maddelerinin düzeylerinin larva popülasyonunun büyümesini desteklemek için yeterli olduğunu ve CEL ilavesinin sınırlı olması gerektiğini belirtmek önemlidir. Bununla birlikte, larvaların nihai bileşimi farklılık gösterir ve bu da böceklerin değerini belirlemek için doğru stratejiyi seçmenin önemini vurgular. Tam yemle beslenen CEL larvaları, daha düşük yağ içeriği ve daha düşük laurik asit seviyeleri nedeniyle hayvan yemi olarak kullanıma daha uygundur; SUC veya MAL diyetleriyle beslenen larvalar, özellikle biyoyakıtta yağın değerini artırmak için preslenerek yağdan arındırmayı gerektirir. sektör. LAC, peynir üretiminden elde edilen peynir altı suyu gibi süt endüstrisi yan ürünlerinde bulunur. Son zamanlarda kullanımı (%3,5 laktoz) larvaların son vücut ağırlığını artırmıştır53. Ancak bu çalışmadaki kontrol diyeti lipid içeriğinin yarısını içeriyordu. Bu nedenle, LAC'ın antibeslenme etkileri, diyetteki lipitlerin larvalarda biyolojik olarak birikmesiyle giderilmiş olabilir.
Önceki çalışmalarda gösterildiği gibi, monosakkaritler ve disakkaritlerin özellikleri BSFL'nin büyümesini önemli ölçüde etkiler ve FA profilini modüle eder. Özellikle, LAC'ın larva gelişimi sırasında diyetteki lipit emilimi için CH'nin varlığını sınırlayarak ve dolayısıyla UFA biyobirikimini teşvik ederek antibeslenme dışı bir rol oynadığı görülmektedir. Bu bağlamda, PUFA ve LAC'ı birleştiren diyetler kullanılarak biyoanalizlerin yapılması ilginç olacaktır. Ayrıca, mikroorganizmaların rolü, özellikle de şeker fermantasyon süreçlerinden türetilen mikrobiyal metabolitlerin (SCFA'lar gibi) rolü, araştırmaya değer bir araştırma konusu olmaya devam etmektedir.
Böcekler, 2017 yılında Agro-Bio Tech, Gembloux, Belçika'da kurulan Fonksiyonel ve Evrimsel Entomoloji Laboratuvarı'nın BSF kolonisinden elde edildi (yetiştirme yöntemleri hakkında daha fazla ayrıntı için bkz. Hoc ve ark. 19). Deneysel denemeler için, üreme kafeslerinden günlük olarak 2,0 g BSF yumurtası rastgele toplandı ve 2,0 kg %70 ıslak tavuk yeminde (Aveve, Leuven, Belçika) kuluçkalandı. Yumurtadan çıktıktan beş gün sonra larvalar substrattan ayrıldı ve deneysel amaçlarla manuel olarak sayıldı. Her partinin başlangıç ​​ağırlığı ölçüldü. Ortalama bireysel ağırlık 7,125 ± 0,41 mg idi ve her tedavinin ortalaması Ek Tablo S2'de gösterilmektedir.
Diyet formülasyonu Barragan-Fonseca ve arkadaşlarının çalışmasından uyarlanmıştır. 38. Kısaca, basit şekerler ve disakkaritlerin dokusal özellikleri olmadığından, larva tavuklar için aynı yem kalitesi, benzer kuru madde (DM) içeriği, yüksek CH (taze diyete göre %10) ve doku arasında bir uzlaşma bulunmuştur. Üreticinin bilgilerine göre (Tavuk Yemi, AVEVE, Leuven, Belçika), test edilen CH (yani çözünür şeker), %16,0 protein, %5,0 toplam lipitlerden oluşan bir diyete otoklavlanmış sulu çözelti (%15,9) olarak ayrı ayrı eklendi, %11,9 kül ve %4,8 lif içeren öğütülmüş tavuk yemi. Her 750 ml'lik kavanozda (17.20 x 11.50 x 6.00 cm, AVA, Tempsee, Belçika), 101.9 g otoklavlanmış CH çözeltisi 37.8 g tavuk yemi ile karıştırıldı. Her diyet için, homojen protein (%11,7), homojen lipitler (%3,7) ve homojen şekerler (%26,9 ilave CH) dahil olmak üzere kuru madde içeriği %37,0 idi. Test edilen CH, glikoz (GLU), fruktoz (FRU), galaktoz (GAL), maltoz (MAL), sükroz (SUC) ve laktozdur (LAC). Kontrol diyeti, H. illucens larvaları38 için sindirilemez olduğu düşünülen selülozdan (CEL) oluşuyordu. 100 adet 5 günlük larva, ortasında 1 cm çapında delik bulunan ve üzeri plastik cibinlik ile kapatılmış kapaklı bir tepsiye yerleştirildi. Her diyet dört kez tekrarlandı.
Larva ağırlıkları deneyin başlamasından üç gün sonra ölçüldü. Her ölçüm için, steril ılık su ve forseps kullanılarak substrattan 20 larva çıkarıldı, kurutuldu ve tartıldı (STX223, Ohaus Scout, Parsippany, ABD). Tartıldıktan sonra larvalar substratın merkezine geri gönderildi. İlk prepupa ortaya çıkana kadar haftada üç kez düzenli olarak ölçümler yapıldı. Bu noktada, daha önce açıklandığı gibi tüm larvaları toplayın, sayın ve tartın. Aşama 6 larvalarını (yani, pupa öncesi aşamadan önceki larva aşamasına karşılık gelen beyaz larvalar) ve prepupaları (yani, BSF larvalarının siyaha döndüğü, beslenmeyi bıraktığı ve metamorfoz için uygun bir ortam aradığı son larva aşaması) ayırın ve - Bileşim analizi için 18°C. Verim, tabak başına (g) elde edilen toplam böcek kütlesinin (6. aşamadaki larvalar ve prepupalar) gelişme süresine (d) oranı olarak hesaplandı. Metindeki tüm ortalama değerler şu şekilde ifade edilmiştir: ortalama ± SD.
Çözücülerin (heksan (Hex), kloroform (CHCl3), metanol (MeOH)) kullanıldığı sonraki tüm adımlar çeker ocak altında gerçekleştirildi ve nitril eldiven, önlük ve koruyucu gözlük takılması gerekiyordu.
Beyaz larvalar bir FreeZone6 dondurarak kurutucuda (Labconco Corp., Kansas City, MO, ABD) 72 saat kurutuldu ve ardından öğütüldü (IKA A10, Staufen, Almanya). Toplam lipitler, Folch yöntemi 54 kullanılarak ±1 g tozdan ekstrakte edildi. Her liyofilize numunenin kalan nem içeriği, toplam lipitleri düzeltmek için bir nem analiz cihazı (MA 150, Sartorius, Göttiggen, Almanya) kullanılarak iki kopya halinde belirlendi.
Yağ asidi metil esterlerini elde etmek için toplam lipitler asidik koşullar altında transesterifiye edildi. Kısaca, yaklaşık 10 mg lipit/100 ul CHCl3 çözeltisi (100 ul), 8 ml'lik bir Pyrex© tüpünde (SciLabware – DWK Life Sciences, Londra, Birleşik Krallık) nitrojen ile buharlaştırıldı. Tüp, Hex (0,5 ml) (PESTINORM®SUPRATRACE n-Heksan > organik iz analizi için %95, VWR Chemicals, Radnor, PA, ABD) ve Hex/MeOH/BF3 (20/25/55) çözeltisine (0,5) yerleştirildi. ml) 70°C'deki su banyosunda 90 dakika süreyle bekletildi. Soğutulduktan sonra %10 sulu H2SO4 çözeltisi (0,2 mi) ve doymuş NaCl çözeltisi (0,5 mi) ilave edildi. Tüpü karıştırın ve karışımı temiz Hex (8,0 mL) ile doldurun. Üst fazın bir kısmı bir şişeye aktarıldı ve bir alev iyonizasyon detektörü (GC-FID) ile gaz kromatografisiyle analiz edildi. Numuneler, bölünmüş modda (bölünmüş akış: 10 mL/dak) bölünmüş/bölünmemiş bir enjektör (240 °C) ile donatılmış bir Trace GC Ultra (Thermo Scientific, Waltham, MA, ABD), bir Stabilwax®-DA kolonu (240 °C) kullanılarak analiz edildi. 30 m, 0,25 mm iç çap, 0,25 μm, Restek Corp., Bellefonte, PA, ABD) ve bir FID (250 °C). Sıcaklık programı şu şekilde ayarlandı: 50 °C'de 1 dakika, 30 °C/dk'da 150 °C'ye artırıldı, 4 °C/dk'da 240 °C'ye çıkarıldı ve 240 °C'de 5 dakika devam edildi. Boş olarak Hex kullanıldı ve tanımlama için 37 yağ asidi metil esteri (Supelco 37 bileşenli FAMEmix, Sigma-Aldrich, Overijse, Belçika) içeren bir referans standardı kullanıldı. Doymamış yağ asitlerinin (UFA'lar) tanımlanması, kapsamlı iki boyutlu GC (GCxGC-FID) ile doğrulandı ve izomerlerin varlığı, Ferrara ve arkadaşlarının yönteminin hafif bir uyarlamasıyla doğru bir şekilde belirlendi. 55. Cihaz ayrıntıları Ek Tablo S3'te ve sonuçlar Ek Şekil S5'te bulunabilir.
Veriler Excel elektronik tablo formatında sunulmaktadır (Microsoft Corporation, Redmond, WA, ABD). İstatistiksel analiz, R Studio (versiyon 2023.12.1+402, Boston, ABD) 56 kullanılarak yapıldı. Larva ağırlığı, gelişme süresi ve üretkenliğe ilişkin veriler, Gauss dağılımına uydukları için doğrusal model (LM) ("lm" komutu, R paketi "stats" 56) kullanılarak tahmin edildi. Binom model analizi kullanılarak hayatta kalma oranları, genel doğrusal model (GLM) ("glm" komutu, R paketi "lme4" 57) kullanılarak tahmin edildi. Normallik ve eş varyanslılık, Shapiro testi (komut "shapiro.test", R paketi "stats" 56) ve veri varyansı analizi (komut betadisper, R paketi "vegan" 58) kullanılarak doğrulandı. LM veya GLM testinden anlamlı p değerlerinin (p < 0,05) ikili analizinden sonra, EMM testi ("emmeans" komutu, R paketi "emmeans" 59) kullanılarak gruplar arasında anlamlı farklar tespit edildi.
Tam FA spektrumları, Öklid mesafe matrisi ve 999 permütasyon kullanılarak çok değişkenli permütasyon varyans analizi (yani permMANOVA; komut "adonis2", R paketi "vegan" 58) kullanılarak karşılaştırıldı. Bu, diyetteki karbonhidratların doğasından etkilenen yağ asitlerinin tanımlanmasına yardımcı olur. FA profillerindeki önemli farklılıklar ikili karşılaştırmalar kullanılarak daha da analiz edildi. Veriler daha sonra temel bileşen analizi (PCA) ("PCA" komutu, R paketi "FactoMineR" 60) kullanılarak görselleştirildi. Bu farklılıklardan sorumlu FA, korelasyon daireleri yorumlanarak belirlendi. Bu adaylar, tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ("aov" komutu, R paketi "istatistikler" 56) ve ardından Tukey'in post hoc testi (TukeyHSD komutu, R paketi "istatistikler" 56) kullanılarak doğrulandı. Analizden önce normallik Shapiro-Wilk testi kullanılarak değerlendirildi, eş varyanslılık Bartlett testi (command “bartlett.test”, R package “stats” 56) kullanılarak kontrol edildi ve iki varsayımdan hiçbiri karşılanmazsa parametrik olmayan bir yöntem kullanıldı. . Analizler karşılaştırıldı (command “kruskal.test”, R package “stats” 56) ve ardından Dunn'ın post hoc testleri uygulandı (command dunn.test, R package “dunn.test” 56).
Taslağın son versiyonu, İngilizce düzeltmen olarak Grammarly Editor (Grammarly Inc., San Francisco, California, ABD)61 kullanılarak kontrol edildi.
Mevcut çalışma sırasında oluşturulan ve analiz edilen veri kümeleri, makul talep üzerine ilgili yazardan temin edilebilir.
Kim, SW ve ark. Yem proteinine yönelik küresel talebin karşılanması: zorluklar, fırsatlar ve stratejiler. Hayvan Biyobilimleri Yıllıkları 7, 221–243 (2019).
Caparros Megido, R., ve diğerleri. Yenilebilir böceklerin dünya üretiminin durumunun ve beklentilerinin gözden geçirilmesi. Entomol. Gen. 44, (2024).
Rehman, K. ur, ve ark. Organik atık yönetimi için potansiyel olarak yenilikçi ve çevre dostu bir araç olarak kara asker sineği (Hermetia illucens): Kısa bir inceleme. Atık Yönetimi Araştırması 41, 81–97 (2023).
Skala, A., ve ark. Substratın yetiştirilmesi, endüstriyel olarak üretilen siyah asker sinek larvalarının büyümesini ve makro besin durumunu etkiler. Bilim. Temsilci 10, 19448 (2020).
Shu, MK ve diğerleri. Ekmek kırıntılarında yetiştirilen siyah asker sinek larvalarından elde edilen yağ ekstraktlarının antimikrobiyal özellikleri. Hayvansal Gıda Bilimi, 64, (2024).
Schmitt, E. ve de Vries, W. (2020). Siyah asker sinek gübresinin gıda üretimi için toprak değişikliği olarak kullanılmasının ve çevresel etkinin azaltılmasının potansiyel faydaları. Güncel görüş. Yeşil Sürdürülebilirlik. 25, 100335 (2020).
Franco A. ve ark. Siyah asker sinek lipitleri: Yenilikçi ve sürdürülebilir bir kaynak. Sürdürülebilir Kalkınma, Cilt. 13, (2021).
Van Huis, A. Gıda ve yem olarak böcekler, tarımda yeni ortaya çıkan bir alan: bir inceleme. J. Böcek Yemi 6, 27–44 (2020).
Kachor, M., Bulak, P., Prots-Petrikha, K., Kirichenko-Babko, M. ve Beganovsky, A. Siyah askerin sanayide ve tarımda uçmasının çeşitli kullanımları - bir inceleme. Biyoloji 12, (2023).
Hock, B., Noel, G., Carpentier, J., Francis, F. ve Caparros Megido, R. Hermetia illucens'in yapay yayılımının optimizasyonu. PLOS BİR 14, (2019).


Gönderim zamanı: 25 Aralık 2024